目的研究Sertoli細(xì)胞對同種異體免疫反應(yīng)過程中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）/輔助性T細(xì)胞17（Th17）平衡的影響。方法體外分離并培養(yǎng)Sertoli細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和骨髓來源的DC細(xì)胞,將Sertoli、DC細(xì)胞分別與同種異體T細(xì)胞混合培養(yǎng),光鏡及電鏡下觀察Sertoli細(xì)胞形態(tài),采用Western blot檢測Sertoli細(xì)胞中人類主要組織相容性復(fù)合體（MHC）-Ⅱ、B7-H1蛋白的表達(dá),收集培養(yǎng)上清液,采用酶聯(lián)免疫吸附實驗（ELISA）法檢測Sertoli細(xì)胞培養(yǎng)上清內(nèi)的轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）-β1、IL-17A等細(xì)胞因子水平;流式細(xì)胞術(shù)觀察混合培養(yǎng)細(xì)胞分化結(jié)果。結(jié)果成功在體外培養(yǎng)Sertoli細(xì)胞;Western blot結(jié)果顯示,Sertoli細(xì)胞與同種異體Na?ve CD4+T細(xì)胞（CD4+CD62L+CD25-）在體外混合培養(yǎng)時,其表面的MHC-Ⅱ類分子和B7-H1分子的表達(dá)量增加;ELISA結(jié)果顯示,與同種異體Na?ve CD4+T細(xì)胞混合培養(yǎng)72h后,培養(yǎng)上清液中的TGF-β1濃度較單純Sertoli培養(yǎng)組顯著升高[（823.10±59.07）pg/mL vs.（17... 

【文章來源】：華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2014,43(06)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實驗動物
    1.2 Sertoli細(xì)胞分離與培養(yǎng)
    1.3 光學(xué)顯微鏡及電子顯微鏡下觀察Sertoli細(xì)胞
    1.4 T淋巴細(xì)胞分離
    1.5 骨髓來源的DC細(xì)胞分離與培養(yǎng)
    1.6 混合細(xì)胞培養(yǎng)
        1.6.1 Sertoli細(xì)胞與同種異體T細(xì)胞混合培養(yǎng)
        1.6.2 DC細(xì)胞與同種異體T細(xì)胞混合培養(yǎng)
    1.7 Western blot檢測
    1.8 分泌細(xì)胞因子檢測
    1.9 流式細(xì)胞術(shù)檢測
    1.1 0 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 小鼠Sertoli細(xì)胞的形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 Sertoli細(xì)胞中B7-H1、MHC-Ⅱ的表達(dá)
    2.3 Sertoli與同種異體Na6ve CD4+T細(xì)胞體外混合培養(yǎng)促進(jìn)TGF-β1的分泌
    2.4 Sertoli細(xì)胞體外誘導(dǎo)Na6ve CD4+T細(xì)胞分化為CD25+Foxp3+Treg細(xì)胞
    2.5 Sertoli/Treg細(xì)胞混合培養(yǎng)上清液抑制DC細(xì)胞誘導(dǎo)Na6ve CD4+T細(xì)胞分化為Th17
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]轉(zhuǎn)化生長因子-β不同亞型對前軟骨干細(xì)胞增殖分化的影響[J]. 丁然,王慶,蔡賢華.  華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(06)
[2]調(diào)節(jié)性T細(xì)胞與Th17細(xì)胞的失衡及其對大鼠肺纖維化的影響[J]. 萬勇,張念,李劍平,孫潔民.  華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2013(02)



本文編號：3474488