目的篩選并鑒定岡田繞眼果蠅轉(zhuǎn)錄組中的絲氨酸蛋白酶抑制蛋白（serine protease inhibitor,serpin）基因,分析其基因結(jié)構(gòu)及在不同發(fā)育時期的表達(dá)水平。方法利用PCR技術(shù)克隆岡田繞眼果蠅serpin基因,對其編碼蛋白的氨基酸序列進(jìn)行生物信息學(xué)分析;利用MEGA 7. 0軟件對獲得的serpin基因進(jìn)行系統(tǒng)進(jìn)化樹分析;利用HMMTOP version2. 0和TMHMM server version 2. 0軟件預(yù)測serpin基因的跨膜結(jié)構(gòu)域;利用RT-q PCR檢測岡田繞眼果蠅幾個不同發(fā)育時期（卵、蛆、蛹、雄蠅和雌蠅）中serpin基因表達(dá)水平。結(jié)果從岡田繞眼果蠅中克隆出serpin基因,開放閱讀框全長1 323 bp,編碼440個氨基酸,岡田繞眼果蠅serpin基因與其他果蠅serpin基因的氨基酸序列一致性最高為76%,serpin基因序列的系統(tǒng)進(jìn)化分析表明岡田繞眼果蠅與Drosophila arizonae的進(jìn)化關(guān)系最接近。岡田繞眼果蠅serpin存在跨膜結(jié)構(gòu),跨膜螺旋區(qū)的位置是第21～43位氨基酸。岡田繞眼果蠅serpin基因在卵、蛆、蛹、雄蠅、雌蠅等不同... 

【文章來源】：醫(yī)學(xué)動物防制. 2019,35(08)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 RNA提取與c DNA合成
        1.2.2 引物設(shè)計
        1.2.3 serpin基因克隆與序列分析
        1.2.4 系統(tǒng)進(jìn)化分析
        1.2.5 跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測
        1.2.6 不同發(fā)育階段表達(dá)譜分析
2 結(jié)果
    2.1 果蠅serpin (Unigene8503) 基因克隆與序列分析
    2.2 serpin跨膜結(jié)構(gòu)域預(yù)測
    2.3 serpin基因組織特異性表達(dá)譜
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]埃及伊蚊絲氨酸蛋白酶抑制蛋白基因家族的篩選和表達(dá)譜分析[J]. 程金芝,劉鑒,翟慧,呂清巧,顏鳳,商正玲,吳家紅.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2017(06)
[2]毛首鞭形線蟲絲氨酸蛋白酶抑制劑TtSerpin1對蛋白酶的抑制作用[J]. 司徒永立,邵正,鄧?yán)?隋細(xì)香,李海艦,許琴英,何慶豐,彭禮飛.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2017(04)
[3]貴州省遵義市岡田繞眼果蠅的誘捕、鑒定及人工飼養(yǎng)[J]. 黃學(xué)貴,張露菲,王靈軍,鄭明輝,劉暉.  醫(yī)學(xué)動物防制. 2017(07)
[4]東方田鼠天然抗體相關(guān)的日本血吸蟲抗原基因篩選和克隆[J]. 閻玉濤,劉述先,宋光承,徐裕信,何永康.  中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志. 2001(03)



本文編號：3473940