目的研究雌激素受體α（estrogen receptorα,ERα）抑制劑甲基-哌啶-吡唑（methyl-piperidino-pyrazole,MPP）在小鼠桑葚胚和滋養(yǎng)層干細(xì)胞（trophoblast stem cells,TSCs）中對(duì)YAP的影響。方法收集昆明（kunming,KM）小鼠8-細(xì)胞胚,置于0μmol/L（對(duì)照組）和5μmol/L（實(shí)驗(yàn)組）MPP中培養(yǎng),分別于8h、12h和24h后收集各組桑葚胚,采用免疫熒光技術(shù)觀察YAP表達(dá),采用Real Time-PCR檢測MPP處理24h后Yap mRNA表達(dá)變化;將小鼠TSCs置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L MPP中培養(yǎng),48h后觀察細(xì)胞形態(tài)改變,分別檢測Sox2、YAP、Cdx2 mRNA和蛋白表達(dá)水平。結(jié)果小鼠8-細(xì)胞胚經(jīng)MPP處理24h后,桑葚胚YAP蛋白核定位水平降低,Yap mRNA水平無顯著改變;經(jīng)MPP處理48h后,5μmol/L組小鼠TSCs細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞團(tuán)塊,10μmol/L組細(xì)胞增殖明顯受抑制;與對(duì)照組相比,5μmol/L組細(xì)胞Sox2 mRNA表達(dá)水平升高,Yap... 

【文章來源】：中國組織化學(xué)與細(xì)胞化學(xué)雜志. 2019,28(01)CSCD

【文章頁數(shù)】：8 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2主要試劑
    3主要儀器設(shè)備
    4小鼠超排卵和受精
    5小鼠8-細(xì)胞胚的收集和體外培養(yǎng)
    6小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞培養(yǎng)與MPP處理
    7免疫熒光染色實(shí)驗(yàn)
    8 Real Time-PCR實(shí)驗(yàn)
    9統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
結(jié)果
    1 YAP在小鼠早、中、末期桑葚胚中的定位分布
    2 MPP處理對(duì)小鼠桑葚胚YAP定位和mRNA表達(dá)的影響
    3 MPP處理對(duì)小鼠TSCs細(xì)胞形態(tài)的影響
    4 MPP對(duì)小鼠TSCs中Sox2、YAP和Cdx2 mRNA表達(dá)的影響
    5 MPP處理對(duì)小鼠TSCs中E-cadherin和YAP定位的影響
    6 MPP處理對(duì)小鼠TSCs中Sox2和Cdx2定位的影響
討論



本文編號(hào)：3465526