腸出血性大腸桿菌（EHEC）O157：H7是一種重要的新發(fā)傳染病病原菌。自1975年被首次分離、1982年被確認(rèn)為致病菌以來的20多年中，世界各地包括中國都有不同規(guī)模的暴發(fā)流行。EHEC O157：H7感染可使人患腹瀉、出血性結(jié)腸炎（hemorrhagic colitis, HC），還可在5～10％的病例中引發(fā)溶血性尿毒綜合征（hemolytic uremic syndrome, HUS）及血栓性血小板減少紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura, TTP）等嚴(yán)重并發(fā)癥，嚴(yán)重者可導(dǎo)致死亡。EHEC O157的感染因具有暴發(fā)流行趨勢、強(qiáng)烈的致病性與致死性和抗生素治療可加劇病情的危險(xiǎn)性等特點(diǎn)，已經(jīng)成為全球性的公共衛(wèi)生問題。目前EHEC O157：H7的全基因組測序已經(jīng)完成，但對(duì)其感染仍缺乏有效的防治方法，研究證明：抗生素可促使O157菌釋放致死性志賀毒素（Stx），從而使患者并發(fā)HUS的危險(xiǎn)性增加。人類同傳染病斗爭的歷史表明，疫苗是人類戰(zhàn)勝傳染病的有力武器。由于O157的暴發(fā)流行和治療上的困難，疫苗研究就顯得尤其緊迫。 O157：H7及其它出血性大... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：97 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

一陰離子交換柱層析純化包涵體的SDS一PAGE分析

第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文索序列一致。測序報(bào)告見附圖2，測序結(jié)果如下:ATGGGCAI，GAAGAAGATGTTTATGGCGGTTTTATTTGCATTAGCTTCTGTTA戶a，GCAATGGCGGCGGArTGTGCTAAAG咤.ATAAI，GAGGATGACACAI，TTACAGTGAAGGTTGACGGGAAAGAAI，CTGCAACCGTTACTGCAAAGTGCTCAGTTGACAGGAAI，GJ詼CCTGTGAAI

二、stxZb基因pMD18一丁重組質(zhì)粒的酶切鑒定pMD18一T重組質(zhì)粒經(jīng)Ncol+N甘‘I雙酶切后，目的片段大小約3O0bP，載體片段大小與pMD18一T空質(zhì)粒單酶切產(chǎn)物一致，初步說明stxZb重組成功，如圖3一2所示。陽性重組質(zhì)粒命名為pMD18一stxZb。1234PMD18一TdigestedbyNcol2一3:PMD18一stxZbdoubledigestedbyNcolandNdel4:100bPDNAladder們。arker重組質(zhì)粒酶切鑒定PP﹄七七叩甲，‘00000b腸3-:5000]，二，二5，二牙二Fig3一2IdentifieationofreeombinantPlas而ds三、重組質(zhì)粒pET28。(+)一st、Zb一eaeC3OO的鑒定重組質(zhì)粒PET28a(+)一stxZb一eaeC3oo分別用Ncol+N漢‘I、Ndel+Xhol和雙酶切后，進(jìn)行1.0%瓊脂糖凝膠電泳(圖3一3所示)，顯示目的條帶依次為:900bp、1200bp，與實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的酶切片段大小相符，初步證實(shí)為重組克隆。12345678Ncol+Xhol300bP、l姍韶900bP500bP300bP100bP1.2:reeombinantPlas而dPET28a(+)一stxZb一eaeC300doubledigestedbyNcol+入以亡L(300bP)3.6:l0()bPDNAladdermarker4.5:reeombinant

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]O157:H7大腸桿菌流行病學(xué)研究概況[J]. 汪華,史智揚(yáng).  江蘇衛(wèi)生保健. 2001(01)
[2]大腸桿菌O157:H7感染的病原學(xué)與流行病學(xué)[J]. 李升團(tuán),韓光紅.  解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志. 1997(05)



本文編號(hào)：3449763