本文關(guān)鍵詞：A群腦膜炎多糖蛋白結(jié)合疫苗的化學(xué)修飾及修飾后免疫學(xué)性質(zhì)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：腦膜炎奈瑟式球菌會(huì)引起嚴(yán)重的疾病比如腦膜炎,作為一種關(guān)鍵的致病因素,腦膜炎莢膜多糖曾作為疫苗用于預(yù)防腦膜炎,但免疫效果較差,不能引起免疫記憶。近年來,多糖結(jié)合疫苗的發(fā)展一定程度上解決了這個(gè)問題。相比傳統(tǒng)多糖疫苗,多糖蛋白結(jié)合疫苗是T細(xì)胞依賴性抗原,對(duì)兩歲以下嬰幼兒的保護(hù)效果有較大幅度提升并有免疫記憶。但已有研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)載體預(yù)免疫結(jié)合疫苗的蛋白時(shí),C群腦膜炎莢膜多糖與破傷風(fēng)類毒素的結(jié)合物在0.025-0.25μg劑量下,多糖的免疫原性提高,在25μg以上時(shí),多糖的免疫原性卻降低。即在預(yù)免疫載體蛋白過載時(shí),會(huì)導(dǎo)致多糖免疫原性抑制(CIES現(xiàn)象)。同時(shí),在多價(jià)結(jié)合疫苗中應(yīng)用相同載體蛋白時(shí),會(huì)使其中一種或多種成分不能充分發(fā)揮免疫反應(yīng)。但還不清楚抑制還是提高蛋白特異性免疫原性可以提高結(jié)合疫苗的多糖特異性免疫原性。另外載體蛋白有特異性,因此研究載體對(duì)多糖免疫原性的影響對(duì)結(jié)合疫苗的發(fā)展有重要作用。本實(shí)驗(yàn)使用FDA批準(zhǔn)使用的線性PEG和載體破傷風(fēng)類毒素(TT)本身做修飾劑,制備出三種A群腦膜炎結(jié)合疫苗。該方法由如下步驟組成:(1)用溴化氰活化腦膜炎球菌多糖,然后用異型雙功能試劑N-2-胺乙基-馬來酰亞胺衍化活化腦膜炎球菌多糖;(2)載體蛋白的巰基化;(3)衍化的腦膜炎球菌多糖與巰基化的載體蛋白結(jié)合;(4)載體蛋白的PEG修飾;當(dāng)PEG與PS的質(zhì)量比為3:10,10:10及修飾劑TT與PS質(zhì)量比1:1時(shí),蛋白的Ig G抗體滴度為修飾前的0.89倍,0.49倍,1.61倍。多糖的Ig G抗體滴度分別是修飾前的2.6倍,0.63倍,0.56倍。我們假設(shè)PEG適當(dāng)抑制蛋白的免疫原性,有利于多糖免疫原性的提高,PEG過度修飾,強(qiáng)烈抑制載體的免疫原性,因不能充分形成APC-MHCII-TCR,不能充分激活T輔助細(xì)胞,從而激活成熟B細(xì)胞,多糖免疫原性反而下降。TT修飾載體時(shí),蛋白的抗原表位劇烈增多,與多糖半抗原競(jìng)爭(zhēng)成熟B細(xì)胞從而產(chǎn)生很強(qiáng)的載體免疫原性并削弱多糖免疫原性。溫和PEG化載體修飾的腦膜炎多糖結(jié)合疫苗可開發(fā)為供人體免疫接種用的新型、高效多糖結(jié)合疫苗,用于預(yù)防流行性腦膜炎奈瑟氏球菌引起的感染,也可用于優(yōu)化聯(lián)合疫苗的免疫計(jì)劃和設(shè)計(jì)理想載體蛋白。
【關(guān)鍵詞】：腦膜炎莢膜多糖 結(jié)合疫苗 聚乙二醇化 寡聚體化 多糖特異性免疫
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R392-33
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第一章 緒論11-25
• 1.1 腦膜炎雙球菌11-13
• 1.2 腦膜炎疫苗的發(fā)展13-15
• 1.3 聚乙二醇的研究和應(yīng)用現(xiàn)狀15-16
• 1.4 雙功能交聯(lián)劑16-17
• 1.5 腦膜炎莢膜多糖結(jié)合蛋白疫苗純化技術(shù)17-19
• 1.6 腦膜炎多糖結(jié)合疫苗常用表征方法19-21
• 1.7 腦膜炎多糖結(jié)合疫苗的免疫學(xué)性質(zhì)評(píng)價(jià)21
• 1.8 立題依據(jù)與實(shí)驗(yàn)思路21-25
• 第二章 A群腦膜炎莢膜多糖結(jié)合疫苗的載體蛋白修飾25-38
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料25-26
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法26-32
• 2.3 結(jié)果與分析32-37
• 2.4 結(jié)論37-38
• 第三章 A群腦膜炎多糖結(jié)合疫苗的結(jié)構(gòu)鑒定38-45
• 3.1 引言38
• 3.2 材料與設(shè)備38
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法38-40
• 3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論40-44
• 3.5 本章小結(jié)44-45
• 第四章 A群腦膜炎多糖結(jié)合疫苗免疫學(xué)性質(zhì)評(píng)價(jià)45-60
• 4.1 引言45
• 4.2 實(shí)驗(yàn)材料45-46
• 4.3 實(shí)驗(yàn)方法46-52
• 4.4 結(jié)果與討論52-57
• 4.5 本章討論57-59
• 4.6 本章總結(jié)59-60
• 第五章 結(jié)論與展望60-62
• 5.1 本文研究成果60-61
• 5.2 論文創(chuàng)新點(diǎn)61
• 5.3 論文展望61-62
• 參考文獻(xiàn)62-68
• 英文縮寫表68-69
• 作者攻讀學(xué)位期間的科研成果69-70
• 致謝70

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 雍元,杜琳,邱曉玲,王燕,何向東,謝貴林;不同蛋白載體的痢疾多糖結(jié)合疫苗小鼠免疫原性對(duì)比試驗(yàn)[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2003年04期

2 雍元,杜琳,杜送田,王燕,陳志宏,謝貴林;痢疾多糖-蛋白結(jié)合疫苗小鼠母子抗體傳遞試驗(yàn)[J];中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志;2004年08期

3 李玉;邱炳光;陳慧雯;吳曉英;;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗副反應(yīng)觀察[J];華南預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年02期

4 王璽;沈榮;;多糖-蛋白結(jié)合疫苗的結(jié)合化學(xué)與檢測(cè)方法[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2008年10期

5 潘慧遠(yuǎn);;國(guó)產(chǎn)b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗和進(jìn)口b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗副反應(yīng)的觀察[J];中國(guó)醫(yī)療前沿;2013年04期

6 杜琳;蔣仁生;;由結(jié)合疫苗產(chǎn)品歷史沿革帶來的思考[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2013年06期

7 徐程林;對(duì)蛋白-多糖結(jié)合疫苗中的未結(jié)合蛋白的高效快速吸附[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);2001年05期

8 趙娜娜;張才軍;王玲;;糖結(jié)合疫苗及其免疫干擾的研究進(jìn)展[J];中國(guó)醫(yī)學(xué)創(chuàng)新;2013年24期

9 林云;b型流感桿菌結(jié)合疫苗[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(預(yù)防、診斷、治療用生物制品分冊(cè));2005年05期

10 譚小梅;劉月萍;朱亞萍;張桓;杜琳;;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗中載體蛋白質(zhì)的效力研究[J];微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展;2007年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

1 吳兵;劉方蕾;王晶;侯亞莉;趙志強(qiáng);楊明;崔萱林;謝貴林;;C群奈瑟氏腦膜炎球菌結(jié)合疫苗工藝穩(wěn)定性及免疫原性研究[A];2011中國(guó)生物制品年會(huì)暨第十一次全國(guó)生物制品學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2011年

2 謝貴林;譚小梅;杜琳;田玉珍;張謙;趙志強(qiáng);王燕;崔萱林;朱莉萍;;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗的研制及應(yīng)用[A];預(yù)防醫(yī)學(xué)學(xué)科發(fā)展藍(lán)皮書（2006卷）[C];2006年

3 農(nóng)藝;李艷萍;李亞楠;陳福生;李春松;黃月葵;葉強(qiáng);;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗免疫原性的比較研究[A];第五次全國(guó)免疫診斷暨疫苗學(xué)術(shù)研討會(huì)論文匯編[C];2011年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 李峰;徐守盛會(huì)見意大利客人[N];甘肅日?qǐng)?bào);2008年

2 王純樸;我市生物產(chǎn)業(yè)將達(dá)國(guó)際先進(jìn)水平[N];蘭州日?qǐng)?bào);2008年

3 記者 趙一蕙;*ST北生重組果然有“后招” 羅益生物登場(chǎng)取代尖山光電[N];上海證券報(bào);2012年

4 記者 楊勇;沃森生物凈利增三成三股東去年四季度減持[N];第一財(cái)經(jīng)日?qǐng)?bào);2012年

5 記者 馮立中;嬰幼兒接種AC群流腦結(jié)合疫苗是安全的[N];健康報(bào);2012年

6 記者 陳文忠;投資4.51億研發(fā)生產(chǎn)疫苗[N];云南日?qǐng)?bào);2009年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王明清;b型流感嗜血桿菌結(jié)合疫苗結(jié)合及凍干制備工藝相關(guān)研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2015年

2 張婷婷;A群腦膜炎多糖蛋白結(jié)合疫苗的化學(xué)修飾及修飾后免疫學(xué)性質(zhì)研究[D];南華大學(xué);2015年

3 杜倩;b型流感嗜血桿菌D蛋白的克隆、表達(dá)、純化及作為結(jié)合疫苗載體的初步研究[D];暨南大學(xué);2011年

4 高潤(rùn)光;以重組B群腦膜炎奈瑟菌fHBP為載體的結(jié)合疫苗的制備及免疫原性研究[D];河北北方學(xué)院;2013年

5 印丹;三種Hib結(jié)合疫苗的免疫原性研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2010年

6 尹珊珊;Hib PRP-TT結(jié)合疫苗的制備及其免疫原性研究[D];延邊大學(xué);2009年

7 楊育芳;B群鏈球菌多糖-蛋白質(zhì)結(jié)合疫苗的研究和制備[D];西北大學(xué);2004年

8 王春娥;白喉無毒變異體CRM_（197）的克隆、表達(dá)、純化及作為結(jié)合疫苗蛋白載體的初步應(yīng)用[D];中國(guó)藥品生物制品檢定所;2007年

9 董巖;腸道細(xì)菌O多糖結(jié)合疫苗生物合成研究[D];中國(guó)食品藥品檢定研究院;2015年

10 辛偉;實(shí)驗(yàn)性傷寒Vi多糖結(jié)合疫苗的初步研究[D];北京生物制品研究所;2001年

  本文關(guān)鍵詞：A群腦膜炎多糖蛋白結(jié)合疫苗的化學(xué)修飾及修飾后免疫學(xué)性質(zhì)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：343569