乙酰膽堿受體（AChR）是肌肉神經(jīng)傳導(dǎo)的重要媒介，是神經(jīng)突觸處化學(xué)信號(hào)與電信號(hào)相互轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵物質(zhì)。在神經(jīng)興奮傳導(dǎo)過(guò)程中，神經(jīng)細(xì)胞膜的興奮能夠引起乙酰膽堿與膜由結(jié)合狀態(tài)釋放為自由狀態(tài)。自由狀態(tài)的乙酰膽堿作為一種化學(xué)信號(hào)能與接受信號(hào)的神經(jīng)細(xì)胞的后突觸的突觸膜上的乙酰膽堿受體結(jié)合，引起乙酰膽堿受體和相關(guān)膜蛋白的構(gòu)象變化，因而使興奮傳遞下去。通常機(jī)體內(nèi)不產(chǎn)生乙酰膽堿受體的抗體，但在自身免疫性疾病-肌無(wú)力癥患者的體內(nèi)，由于某些原因，如遺傳和免疫反應(yīng)等，產(chǎn)生了乙酰膽堿受體的抗體。這種異�？贵w可與乙酰膽堿受體結(jié)合，引起與機(jī)體內(nèi)乙酰膽堿結(jié)合的乙酰膽堿受體的數(shù)量的減少，削弱神經(jīng)突觸間的傳遞，導(dǎo)致重癥肌無(wú)力的發(fā)生。 因此，乙酰膽堿受體（AChR）結(jié)構(gòu)與功能的研究是突破重癥肌無(wú)力癥發(fā)病機(jī)理和可能治療手段的關(guān)鍵。但要從生物組織獲得乙酰膽堿受體，由于得率太低，分離純化困難，不能滿足肌無(wú)力癥的機(jī)理和治療研究的需求。利用基因工程技術(shù)，獲得目的蛋白無(wú)疑是比較理想的手段。但是乙酰膽堿受體的可溶性表達(dá)一直是困擾科研工作者的瓶頸問(wèn)題，大多數(shù)融合表達(dá)產(chǎn)物都以包涵體的形式存住，這樣為下一步的有關(guān)乙酰膽堿受體的結(jié)構(gòu)和功能方... 

【文章來(lái)源】：山西大學(xué)山西省

【文章頁(yè)數(shù)】：44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    一. 乙酰膽堿受體的形成，發(fā)育和再生
    二. 正常乙酰膽堿受體的形態(tài)學(xué)
    三. 正常乙酰膽堿受體(AChR)的結(jié)構(gòu)和功能
    四. 乙酰膽堿受體的作用機(jī)理
    五. AChR亞基突變對(duì)MG發(fā)病的影響
    六. 肌肉乙酰膽堿受體與自身免疫應(yīng)答反應(yīng)
    七. 神經(jīng)乙酰膽堿受體與自身免疫應(yīng)答反應(yīng)
    八. 重癥肌無(wú)力與其它自身免疫疾病的治療
    九. 引起乙酰膽堿受體結(jié)構(gòu)改變的因素
    十. 病理情況下乙酰膽堿受體的形態(tài)學(xué)
第二章 實(shí)驗(yàn)部分
    1 材料
        1.1 菌種與質(zhì)粒
        1.2 工具酶及主要生化試劑
        1.3 免疫分析試劑
        1.4 主要試劑配制
    2 方法
        2.1 AChRα_(205)基因片段的克隆及重組子pMARα_(205)的構(gòu)建
        2.2 MBP-AChRα_(205)蛋白的融合表達(dá)
        2.3 MBP-AChRα_(205)蛋白的純化
        2.4 MBP-AChRα_(205)蛋白的酶切
        2.5 MBP-AChRα_(205)和AChRα_(205)蛋白的免疫學(xué)性質(zhì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 重組子pMARα_(205)的構(gòu)建流程圖
        3.2 重組子pMARα_(205)的雙酶切分析
        3.3 MBP-AChRα_(205)蛋白的表達(dá)
        3.4 MBP-AChRα_(205)的免疫學(xué)活性
        3.5 MBP-AChRα_(205)的純化
        3.6 融合蛋白MBP-AChRα_(205)的Factor Xa酶切
        3.7 融合蛋白MBP-AChRα_(205)與Factor Xa酶切產(chǎn)物的Western blotting分析
        3.8 融合蛋白MBP-AChRα_(205)與Factor Xa酶切產(chǎn)物的ELISA檢測(cè)
    4 討論
參考文獻(xiàn)
附錄(已發(fā)表和待發(fā)表的敘述論文)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]乙酰膽堿受體分子結(jié)構(gòu)的研究進(jìn)展[J]. 徐世元.  國(guó)外醫(yī)學(xué).麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè). 1997(04)
[2]中樞煙堿樣乙酰膽堿受體的分子藥理學(xué)研究進(jìn)展[J]. 宮澤輝.  國(guó)外醫(yī)學(xué).藥學(xué)分冊(cè). 1997(02)



本文編號(hào)：3432139