發(fā)布時間：2021-10-12 07:30

　　乙酰膽堿受體（AChR）是肌肉神經(jīng)傳導的重要媒介，是神經(jīng)突觸處化學信號與電信號相互轉移的關鍵物質。在神經(jīng)興奮傳導過程中，神經(jīng)細胞膜的興奮能夠引起乙酰膽堿與膜由結合狀態(tài)釋放為自由狀態(tài)。自由狀態(tài)的乙酰膽堿作為一種化學信號能與接受信號的神經(jīng)細胞的后突觸的突觸膜上的乙酰膽堿受體結合，引起乙酰膽堿受體和相關膜蛋白的構象變化，因而使興奮傳遞下去。通常機體內不產(chǎn)生乙酰膽堿受體的抗體，但在自身免疫性疾病-肌無力癥患者的體內，由于某些原因，如遺傳和免疫反應等，產(chǎn)生了乙酰膽堿受體的抗體。這種異�？贵w可與乙酰膽堿受體結合，引起與機體內乙酰膽堿結合的乙酰膽堿受體的數(shù)量的減少，削弱神經(jīng)突觸間的傳遞，導致重癥肌無力的發(fā)生。 因此，乙酰膽堿受體（AChR）結構與功能的研究是突破重癥肌無力癥發(fā)病機理和可能治療手段的關鍵。但要從生物組織獲得乙酰膽堿受體，由于得率太低，分離純化困難，不能滿足肌無力癥的機理和治療研究的需求。利用基因工程技術，獲得目的蛋白無疑是比較理想的手段。但是乙酰膽堿受體的可溶性表達一直是困擾科研工作者的瓶頸問題，大多數(shù)融合表達產(chǎn)物都以包涵體的形式存住，這樣為下一步的有關乙酰膽堿受體的結構和功能方... 

【文章來源】：山西大學山西省

【文章頁數(shù)】：44 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    一. 乙酰膽堿受體的形成，發(fā)育和再生
    二. 正常乙酰膽堿受體的形態(tài)學
    三. 正常乙酰膽堿受體(AChR)的結構和功能
    四. 乙酰膽堿受體的作用機理
    五. AChR亞基突變對MG發(fā)病的影響
    六. 肌肉乙酰膽堿受體與自身免疫應答反應
    七. 神經(jīng)乙酰膽堿受體與自身免疫應答反應
    八. 重癥肌無力與其它自身免疫疾病的治療
    九. 引起乙酰膽堿受體結構改變的因素
    十. 病理情況下乙酰膽堿受體的形態(tài)學
第二章 實驗部分
    1 材料
        1.1 菌種與質粒
        1.2 工具酶及主要生化試劑
        1.3 免疫分析試劑
        1.4 主要試劑配制
    2 方法
        2.1 AChRα_(205)基因片段的克隆及重組子pMARα_(205)的構建
        2.2 MBP-AChRα_(205)蛋白的融合表達
        2.3 MBP-AChRα_(205)蛋白的純化
        2.4 MBP-AChRα_(205)蛋白的酶切
        2.5 MBP-AChRα_(205)和AChRα_(205)蛋白的免疫學性質分析
    3 實驗結果
        3.1 重組子pMARα_(205)的構建流程圖
        3.2 重組子pMARα_(205)的雙酶切分析
        3.3 MBP-AChRα_(205)蛋白的表達
        3.4 MBP-AChRα_(205)的免疫學活性
        3.5 MBP-AChRα_(205)的純化
        3.6 融合蛋白MBP-AChRα_(205)的Factor Xa酶切
        3.7 融合蛋白MBP-AChRα_(205)與Factor Xa酶切產(chǎn)物的Western blotting分析
        3.8 融合蛋白MBP-AChRα_(205)與Factor Xa酶切產(chǎn)物的ELISA檢測
    4 討論
參考文獻
附錄(已發(fā)表和待發(fā)表的敘述論文)
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]乙酰膽堿受體分子結構的研究進展[J]. 徐世元.  國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊. 1997(04)
[2]中樞煙堿樣乙酰膽堿受體的分子藥理學研究進展[J]. 宮澤輝.  國外醫(yī)學.藥學分冊. 1997(02)



本文編號：3432139