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亞洲型寨卡病毒實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測方法建立

發(fā)布時(shí)間:2021-10-07 23:59
  目的分析亞洲型寨卡病毒基因組序列特征,建立亞洲型寨卡病毒的熒光定量PCR檢測技術(shù)。方法通過分析亞洲型寨卡病毒全基因組核酸序列,選取亞洲型寨卡病毒的保守區(qū)設(shè)計(jì)引物和TaqMan探針,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線并檢測其特異性與敏感性。結(jié)果熒光定量PCR測試結(jié)果表明所設(shè)計(jì)的引物和探針特異性良好,對(duì)非洲型寨卡病毒、Ⅰ~Ⅳ型登革病毒和丙型肝炎病毒核酸檢測無交叉反應(yīng);同時(shí)靈敏度較高,可達(dá)3.415×100 copies/μL;構(gòu)建了標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程為Y=–3.227 3logX+38.79,相關(guān)系數(shù)R2=1,擴(kuò)增效率E=102%。結(jié)論建立了一種檢測亞洲型寨卡病毒的熒光定量PCR技術(shù),可用于臨床亞洲型寨卡病毒感染患者的病原分型、早期診斷及預(yù)防。 

【文章來源】:中國公共衛(wèi)生. 2019,35(01)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:4 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 病毒株與質(zhì)粒
        1.1.2 主要試劑與儀器
    1.2 方法
        1.2.1 引物探針設(shè)計(jì)
        1.2.2亞洲型寨卡病毒陽性標(biāo)準(zhǔn)品制備
        1.2.3 特異性試驗(yàn)
        1.2.4 敏感試驗(yàn)
        1.2.5 熒光定量PCR反應(yīng)
2 結(jié)果
    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 (圖1、2)
    2.2 特異性 (圖3)
    2.3敏感性 (圖4、表1)
3 討論


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]寨卡病毒NS1的結(jié)構(gòu)研究進(jìn)展及其應(yīng)用[J]. 陳江濤,張建瓊.  病毒學(xué)報(bào). 2017(05)
[2]一種基于實(shí)時(shí)熒光定量PCR的寨卡病毒檢測方法的建立[J]. 朱奇軒,陳錦龍,尹飛飛,張優(yōu),王珊珊,吳悅,崔秀吉,李奕基,梁培,符瑞佳,呂剛.  熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2017(06)
[3]寨卡病毒檢測技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 覃直然,陸維智,劉旭玲,余健海,劉雨菁,李盈,趙衛(wèi).  華南預(yù)防醫(yī)學(xué). 2016(05)
[4]寨卡病毒基因序列分析及核酸檢測方法[J]. 狄弘瑋,彭浩然,朱善邦,朱詩應(yīng),戚中田,唐海琳,趙平.  第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2016(06)
[5]Phylogenetic analysis revealed the central roles of two African countries in the evolution and worldwide spread of Zika virus[J]. Shu Shen,Junming Shi,Jun Wang,Shuang Tang,Hualin Wang,Zhihong Hu,Fei Deng.  Virologica Sinica. 2016(02)
[6]寨卡病毒和寨卡病毒病[J]. 張碩,李德新.  病毒學(xué)報(bào). 2016(01)



本文編號(hào):3423031

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