目的探討在體外生長環(huán)境下不同濃度氯化鋰對脂肪干細胞（ADSCs）增殖和成骨分化的作用及其可能的機制。方法①從3周齡SD大鼠腹股溝脂墊分離出脂肪組織,使用0.1%Ⅰ型膠原酶消化后置于含10%胎牛血清DMEM培養(yǎng),以0、2.5、5、10、20、40 mmol/L濃度的氯化鋰作用ADSCs24、48、72 h,用MTT法測定氯化鋰對細胞增殖的作用;②ADSCs加入含0、2.5、5、10、20、40 mmol/L氯化鋰的成骨培養(yǎng)液中培養(yǎng)7 d后測定細胞中堿性磷酸酶（AKP）的活性;③用RT-PCR法檢測成骨誘導3 d后,不同濃度氯化鋰作用7 d時ADSCs中β-catenin、糖原合成激酶3β、AKP的表達。結果在體外環(huán)境培養(yǎng)下,低濃度氯化鋰（2.5、5、10 mmol/L）促進干細胞增殖,高濃度氯化鋰（20、40 mmol/L）抑制細胞增殖。5、10 mmol/L氯化鋰促進ADSCs中AKP的活性,但是40 mmol/L具有明顯抑制AKP活性的作用。同時,氯化鋰能上調β-catenin和AKP的表達。結論氯化鋰在體外對大鼠ADSCs增殖有雙重影響,并且促進AKP活性和ADSCs成骨分化,具有... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學學報. 2014,49(05)北大核心

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【部分圖文】：

倒置顯微鏡下第3代ADSCs形態(tài)×100

第2、3天氯化鋰作用效果較明顯，低濃度氯化鋰(2．5、5、10mmol/L)可以引起大鼠ADSCs有絲分裂，有利于細胞增殖，第3天時效果顯著;高濃度氯化鋰(20、40mmol/L)抑制細胞的增殖。見圖2。圖2不同濃度氯化鋰對大鼠ADSCs增殖的影響(n=3，x珋±s)與2d的對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．05;與3d的對照組(0mmol/L)比較:△P＜0．05表2不同濃度氯化鋰對大鼠脂肪干細胞AKP活性的影響(n=3，x珋±s)氯化鋰(mmol/L)AKP活性(U/100ml)02．330±0．5202．52．903±0．52754．616±0．732*103．346±0．629*202．070±0．585401．443±0．130*與對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．052．3AKP活性檢測大鼠ADSCs經過氯化鋰處理7d后檢測，與對照組比較，5、10mmol/L組對細胞AKP活性的促進作用較顯著。見表2。2．4ＲT-PCＲ檢測與對照組比較，β-catenin的mＲNA表達量隨著氯化鋰濃度的升高而上升(F=64.74)。GSK-3β的mＲNA表達量隨著氯化鋰濃度的升高而降低(F=47.51)。AKPmＲNA表達在5mmol/L組時最高，隨后依次下降(F=68.83)。見圖3。圖3不同濃度氯化鋰作用ADSCs7d后mＲNA的表達M:Marker;1～6:氯化鋰濃度依次為0、2.5、5、10、20、40mmol/L;與對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．05·592·安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(5)

第2、3天氯化鋰作用效果較明顯，低濃度氯化鋰(2．5、5、10mmol/L)可以引起大鼠ADSCs有絲分裂，有利于細胞增殖，第3天時效果顯著;高濃度氯化鋰(20、40mmol/L)抑制細胞的增殖。見圖2。圖2不同濃度氯化鋰對大鼠ADSCs增殖的影響(n=3，x珋±s)與2d的對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．05;與3d的對照組(0mmol/L)比較:△P＜0．05表2不同濃度氯化鋰對大鼠脂肪干細胞AKP活性的影響(n=3，x珋±s)氯化鋰(mmol/L)AKP活性(U/100ml)02．330±0．5202．52．903±0．52754．616±0．732*103．346±0．629*202．070±0．585401．443±0．130*與對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．052．3AKP活性檢測大鼠ADSCs經過氯化鋰處理7d后檢測，與對照組比較，5、10mmol/L組對細胞AKP活性的促進作用較顯著。見表2。2．4ＲT-PCＲ檢測與對照組比較，β-catenin的mＲNA表達量隨著氯化鋰濃度的升高而上升(F=64.74)。GSK-3β的mＲNA表達量隨著氯化鋰濃度的升高而降低(F=47.51)。AKPmＲNA表達在5mmol/L組時最高，隨后依次下降(F=68.83)。見圖3。圖3不同濃度氯化鋰作用ADSCs7d后mＲNA的表達M:Marker;1～6:氯化鋰濃度依次為0、2.5、5、10、20、40mmol/L;與對照組(0mmol/L)比較:*P＜0．05·592·安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014May;49(5)


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