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銅綠假單胞菌表面(氧化)低密度脂蛋白配體的研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-05 22:58
  【背景】研究發(fā)現(xiàn)銅綠假單胞菌(Pseudomonas aeruginosa)與(氧化)低密度脂蛋白(Low density lipoprotein,LDL/oxidized low density lipoprotein,ox LDL)具有特異性相互作用,有報(bào)道證實(shí)P. aeruginosa表達(dá)的Rah U蛋白可以與LDL/ox LDL特異性結(jié)合!灸康摹框(yàn)證Rah U蛋白是否是P.aeruginosa表面主要的LDL/ox LDL配體。【方法】大腸桿菌表達(dá)Rah U蛋白(r Rah U),ELISA驗(yàn)證r Rah U與LDL/ox LDL的相互作用。利用同源重組的方法構(gòu)建RahU基因缺失突變株(ΔRahU菌株)作為陰性對(duì)照菌株,制備小鼠抗r Rah U抗體,經(jīng)WesternBlot及ELISA分別檢測(cè)抗r Rah U抗體與P.aeruginosa野生型菌株膜蛋白中RahU蛋白及菌體表面RahU蛋白的結(jié)合。通過(guò)ELISA方法對(duì)P. aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株與LDL/ox LDL的結(jié)合差異進(jìn)行比較,并對(duì)不同蛋白酶水解ΔRahU菌體表面蛋白后ΔRahU菌株與LDL/o... 

【文章來(lái)源】:微生物學(xué)通報(bào). 2019,46(10)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】:8 頁(yè)

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 供試菌株及培養(yǎng)基
    1.2 主要試劑和儀器
    1.3 RahU基因缺失突變株(ΔRah U菌株)的構(gòu)建
    1.4 小鼠抗rRahU抗體的制備
    1.5 P.aeruginosa野生型菌株及ΔRahU菌株膜蛋白的分離
    1.6 ELISA檢測(cè)rRahU蛋白與LDL/oxLDL的相互作用
    1.7 ELISA及Western Blot檢測(cè)P.aeruginosa菌株表面RahU蛋白的表達(dá)
    1.8 ELISA檢測(cè)Rah U蛋白是否是P.aeruginosa CMCC10104菌株表面唯一LDL/ox LDL配體
2 結(jié)果與分析
    2.1 ΔRahU菌株的鑒定
    2.2 rRahU蛋白與LDL/oxLDL的相互作用
    2.3 RahU蛋白在P.aeruginosa細(xì)胞表面表達(dá)的鑒定
    2.4 RahU蛋白對(duì)P.aeruginosa CMCC10104與LDL/oxLDL結(jié)合的影響
    2.5 P.aeruginosa表面其他LDL/ox LDL配體的研究
3 討論
4 結(jié)論



本文編號(hào):3386244

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