趨化因子MIP-2y是本實(shí)驗(yàn)室于2000年從人樹突狀細(xì)胞cDNA文庫(kù)中通過(guò)大規(guī)模隨機(jī)測(cè)序而獨(dú)立發(fā)現(xiàn)的一個(gè)屬于CXC家族的新型趨化因子（BRAK為另一個(gè)研究小組給以的命名,CXCL14為國(guó)際專門命名委員會(huì)給以的統(tǒng)一名稱,下文將一律使用CXCL14這一名稱）。研究表明CXCL14對(duì)中性粒細(xì)胞具有強(qiáng)力的趨化作用,對(duì)樹突狀細(xì)胞具有較弱的趨化作用,而對(duì)單核細(xì)胞、NK細(xì)胞、T和B淋巴細(xì)胞不具有趨化作用。該趨化因子在大多數(shù)正常組織中呈組成型表達(dá),而在大多數(shù)腫瘤細(xì)胞系中未能檢測(cè)到。目前關(guān)于該趨化因子在體內(nèi)的具體生理作用還不清楚,這主要是由于迄今為止該趨化因子的受體還未被克隆出來(lái)。 趨化因子受體屬于七次跨膜的G蛋白耦聯(lián)受體（GPCR）超家族,而GPCR是當(dāng)前臨床用藥最主要的靶點(diǎn)。目前還有約150個(gè)所謂孤兒GPCR的天然配體及功能未知,國(guó)際上有多家實(shí)驗(yàn)室和許多生物及制藥公司一直致力于破解（deorphanize）這些孤兒GPCR,包括尋找CXCL14受體,這一方面對(duì)于深入研究CXCL14的功能是必需的,同時(shí)也具有極大的臨床開發(fā)前景,可至今還未克隆成功。本研究也是想通過(guò)不同的策略和技術(shù)路線來(lái)克隆CXC... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：90 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

SD-sPS(lE分析CXCL14一GST融合蛋白的表達(dá)及純化

SDS一PSGE分析GST蛋白的表達(dá)及純化

圖7.G蛋白禍聯(lián)受體的結(jié)構(gòu)特征48R四er7.歇川eutar一ehaareteristicsorGpmtein·coup一“erceptosr.48GProtein一couPledreeePtosrhvaehePthaeliacldomains.AnlinotemriniaerextraecllularsPacenadachtoxytemriniarePersentnitheintraeellularconsevredocmmollmotisfineachTMofllwo:TMI，GNorGxUxxDxxxxxxx()P:TM111，Sxxx伙xhxDE/RY;TM，VYWxxxxxxxxFxxPoxxxxx;YTMVl，F(xiàn)xxCxxP;andTMVll，伙xxxxxxN心PoY.分析其可能的原因有如下幾條。首先，在大腸桿菌中進(jìn)行的原核表達(dá)融合蛋白有可能折疊不完全正確，因此與其受體結(jié)合時(shí)的親和力太低甚至性。其二，靶細(xì)胞選擇不恰當(dāng)或靶細(xì)胞數(shù)量不夠，有可能KG一1細(xì)胞CXCL14受體，之所以選擇該細(xì)胞是根據(jù)以前的生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果;另外我們量為3xl護(hù)，而文獻(xiàn)報(bào)道有多至109細(xì)胞的。其三，還有可能是檢測(cè)方法無(wú)法檢測(cè)出微量的受體蛋白，甚至用銀染也未見預(yù)期的蛋白條帶，因此文性氨基酸進(jìn)行代謝標(biāo)記然后用放射性自顯影來(lái)檢測(cè)。此外結(jié)合緩沖液的組。


本文編號(hào)：3378096