建立制備炭疽芽胞桿菌檢測基因芯片的技術(shù) ,并探討研制檢測炭疽芽胞桿菌基因芯片的方法。酶切炭疽芽胞桿菌的毒素質(zhì)粒和莢膜質(zhì)粒 ,通過建立質(zhì)粒DNA文庫的方法獲取探針 ,并打印在經(jīng)過氨基化修飾的玻片上 ,制成用于炭疽芽胞桿菌檢測的基因芯片。收集了 2 90個陽性克隆探針 ,制備了檢測炭疽芽胞桿菌的基因芯片。提取炭疽芽胞桿菌質(zhì)粒DNA與基因芯片雜交 ,經(jīng)ScanArrayLite芯片閱讀儀掃描得到初步的雜交熒光圖像。通過分析探針的雜交信號初步篩選出 2 73個基因片段作為芯片下一步研究的探針 

【文章來源】：微生物學(xué)報. 2004,(03)北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

炭疽芽胞桿菌基因芯片的點陣圖

將毒素質(zhì)粒pX01和莢膜質(zhì)粒pX02 DNA的限制性酶切產(chǎn)物克隆到T載體后,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,然后以T載體上的引物SO100、SO101進行PCR擴增鑒定,以2%的瓊脂糖凝膠電泳,得到大小不等的片段,從電泳圖可見大多數(shù)擴增條帶單一清晰,大小多數(shù)在250~1000bp范圍內(nèi),可選擇作為基因芯片的探針(圖2)。

將毒素質(zhì)粒pX01和莢膜質(zhì)粒pX02 DNA的限制性酶切產(chǎn)物克隆到T載體后,轉(zhuǎn)化大腸桿菌,然后以T載體上的引物SO100、SO101進行PCR擴增鑒定,以2%的瓊脂糖凝膠電泳,得到大小不等的片段,從電泳圖可見大多數(shù)擴增條帶單一清晰,大小多數(shù)在250~1000bp范圍內(nèi),可選擇作為基因芯片的探針(圖2)。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]基因芯片技術(shù)檢測環(huán)境中常見致病菌的初步研究[J]. 靳連群,李君文,王升啟,晁福寰,王新為.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2003(01)
[2]利用基因芯片技術(shù)篩選HIV-1F亞型基因限制性顯示探針[J]. 李凌,馬文麗,祝驥,石嶸,鄭文嶺.  中國生物化學(xué)與分子生物學(xué)報. 2002(05)



本文編號：3341601