發(fā)布時間：2021-08-11 07:00

　　目的:研究單甲氧基聚乙二醇丙醛（mPEG-ALD,20KD）修飾重組人生長激素（rhGH）的最適反應(yīng)條件以及修飾產(chǎn)物的純化方法;并以目標產(chǎn)物——單聚PEO-rhGH為研究對象,對其相對分子量、純度、等電點、修飾位點、二級結(jié)構(gòu)、分子構(gòu)象、體外受體親和力以及體內(nèi)生物學(xué)活性進行了研究。方法:用SDS-PAGE分析不同反應(yīng)條件對修飾反應(yīng)產(chǎn)物的影響;用離子交換及分子篩進行分離純化;通過分子篩高效液相（Size Exclusion HPLC）、毛細管等電聚焦（CIEF）、圓二色譜（CD）、質(zhì)譜、以及熒光光譜等方法對單聚PEG-rhGH的純度、等電點、二級結(jié)構(gòu)、相對分子量、修飾位點以及分子構(gòu)象進行了研究;采用妊娠兔肝細胞膜放射受體分析法（RRA）檢測單聚PEG-rhGH的體外受體親和力;利用未成年去垂體大鼠體重增加法檢測單聚PEG-rhGH的體內(nèi)生物活性。結(jié)果:通過篩選,選定pH6.0,rhGH與mPEG-ALD質(zhì)量比1:8,反應(yīng)時間16h為最佳修飾條件。在此條件下,單聚PEG-rhGH的比例可達77.8%;經(jīng)兩步分離純化,目標產(chǎn)物單聚PEG-rhGH的得率達到52.9%。樣品在分子篩高效液相圖譜上... 

【文章來源】：安徽大學(xué)安徽省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

單聚PEG一hrGH質(zhì)譜掃描圖


本文編號：3335699