目的:研究單甲氧基聚乙二醇丙醛（mPEG-ALD,20KD）修飾重組人生長(zhǎng)激素（rhGH）的最適反應(yīng)條件以及修飾產(chǎn)物的純化方法;并以目標(biāo)產(chǎn)物——單聚PEO-rhGH為研究對(duì)象,對(duì)其相對(duì)分子量、純度、等電點(diǎn)、修飾位點(diǎn)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、分子構(gòu)象、體外受體親和力以及體內(nèi)生物學(xué)活性進(jìn)行了研究。方法:用SDS-PAGE分析不同反應(yīng)條件對(duì)修飾反應(yīng)產(chǎn)物的影響;用離子交換及分子篩進(jìn)行分離純化;通過(guò)分子篩高效液相（Size Exclusion HPLC）、毛細(xì)管等電聚焦（CIEF）、圓二色譜（CD）、質(zhì)譜、以及熒光光譜等方法對(duì)單聚PEG-rhGH的純度、等電點(diǎn)、二級(jí)結(jié)構(gòu)、相對(duì)分子量、修飾位點(diǎn)以及分子構(gòu)象進(jìn)行了研究;采用妊娠兔肝細(xì)胞膜放射受體分析法（RRA）檢測(cè)單聚PEG-rhGH的體外受體親和力;利用未成年去垂體大鼠體重增加法檢測(cè)單聚PEG-rhGH的體內(nèi)生物活性。結(jié)果:通過(guò)篩選,選定pH6.0,rhGH與mPEG-ALD質(zhì)量比1:8,反應(yīng)時(shí)間16h為最佳修飾條件。在此條件下,單聚PEG-rhGH的比例可達(dá)77.8%;經(jīng)兩步分離純化,目標(biāo)產(chǎn)物單聚PEG-rhGH的得率達(dá)到52.9%。樣品在分子篩高效液相圖譜上... 

【文章來(lái)源】：安徽大學(xué)安徽省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：48 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

單聚PEG一hrGH質(zhì)譜掃描圖


本文編號(hào)：3335699