本文關(guān)鍵詞：鼠尾血管內(nèi)皮細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)由一層扁平上皮細(xì)胞組成,襯貼在血管內(nèi)側(cè),形成血管的內(nèi)壁。血管內(nèi)皮細(xì)胞具有多種功能,除了具有屏障作用之外,血管內(nèi)皮細(xì)胞還可以合成、分泌多種細(xì)胞因子,在血管運(yùn)動、炎癥損傷以及免疫應(yīng)答中具有重要作用。自從人血管內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)方法被報(bào)道之后,其它動物來源的血管內(nèi)皮細(xì)胞分離與培養(yǎng)方法也陸續(xù)被報(bào)道。內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)的成功具有重要意義,既可以此研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)與功能,同時(shí)也可以為血管生成在多種疾病發(fā)生與發(fā)展中的作用研究奠定基礎(chǔ)。內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)方法常采用組織塊法和酶消化法等,但這些方法都有各自的缺點(diǎn),還需要逐步改進(jìn)與完善。血管抑素(Angiostatin)可以顯著抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖與遷移,進(jìn)而抑制血管生成過程。由于血管生成在腫瘤發(fā)生和轉(zhuǎn)移過程中具有的重要作用,因此,通過血管抑素的抗血管生成作用而抑制腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移,對于腫瘤治療是非常有潛力的,目前正處于臨床實(shí)驗(yàn)階段。貫葉連翹(Hypericum perforatum Linn)是藤黃科金絲桃屬植物。貫葉連翹提取物中具有多種化學(xué)成分,具有抗抑郁、抗腫瘤、抗病毒等多種作用。在成功構(gòu)建鼠尾血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)方法之后,我們又通過血管抑素及貫葉連翹提取物對這種血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響進(jìn)行了試驗(yàn)觀察。本論文主要研究結(jié)果如下:1.鼠尾血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)從小鼠尾部剝離出血管,去掉血管表面組織,血管表面經(jīng)膠原酶消化,將血管切成小段后移至培養(yǎng)板中,包被基質(zhì)膠后加入培養(yǎng)基培養(yǎng),2天后可見內(nèi)皮細(xì)胞從血管邊緣擴(kuò)散生長,逐漸形成細(xì)胞集落。鏡下可見,細(xì)胞融匯成片后呈典型的“卵石鋪路樣”排列。2.血管內(nèi)皮細(xì)胞鑒定經(jīng)血管內(nèi)皮細(xì)胞表面標(biāo)志物CD31抗體鑒定,95%以上的細(xì)胞為血管內(nèi)皮細(xì)胞,證實(shí)了利用小鼠的尾部血管作為血管內(nèi)皮細(xì)胞來源,建立體外細(xì)胞培養(yǎng)方式的可行性。3.血管抑素對血管內(nèi)皮細(xì)胞的抑制作用在建立血管內(nèi)皮細(xì)胞原代培養(yǎng)方法的基礎(chǔ)上,我們采用MTT法對重組人血管抑素K1-3(rh K1-3),進(jìn)行了部分生物學(xué)活性檢測。檢測結(jié)果發(fā)現(xiàn):rh K1-3對血管內(nèi)皮細(xì)胞生長具有顯著的抑制作用,并存在一定的量效關(guān)系。4.貫葉連翹提取物對血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響將貫葉連翹提取物與血管內(nèi)皮細(xì)胞共培養(yǎng),藥物終濃度分別為0.025μg/ml、0.25μg/ml、2.5μg/ml。MTT法檢測結(jié)果表明:在0.25μg/ml濃度下,貫葉連翹提取物可增強(qiáng)血管內(nèi)皮細(xì)胞的活力。
【關(guān)鍵詞】：血管生成 原代培養(yǎng) 血管抑素 貫葉連翹提取物 藥物篩選
【學(xué)位授予單位】：東北師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-9
• 前言9-21
• 一、血管內(nèi)皮細(xì)胞簡介9-11
• （一）血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)9
• （二）血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能9-11
• 二、血管內(nèi)皮細(xì)胞與血管生成11-12
• 三、血管內(nèi)皮細(xì)胞與腫瘤12-14
• （一）腫瘤的發(fā)生12
• （二）腫瘤的血管生成12-14
• 四、體外血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)14-16
• （一）體外血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)展概述14
• （二）體外血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)來源14
• （三）體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞條件14-15
• （四）體外培養(yǎng)的血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)15
• （五）體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞的應(yīng)用15-16
• 五、血管抑素16-20
• （一）血管抑素的發(fā)現(xiàn)16
• （二）血管抑素的結(jié)構(gòu)16-17
• （三）血管抑素的作用機(jī)制17-19
• （四）血管抑素治療腫瘤研究19-20
• 六、貫葉連翹研究現(xiàn)狀20-21
• 引言21-22
• 一、實(shí)驗(yàn)材料與方法22-26
• （一）實(shí)驗(yàn)材料及試劑22
• （二）實(shí)驗(yàn)儀器及器材22
• （三）實(shí)驗(yàn)方法22-26
• 二、實(shí)驗(yàn)結(jié)果26-32
• （一）鼠尾血管的提取26-27
• （二）鼠尾血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長與形態(tài)27-28
• （三）內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定28-29
• （四）血管抑素對小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株增殖的影響作用29-30
• （五）血管抑素對鼠尾原代血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響作用30-31
• （六）貫葉連翹提取物對血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的影響31-32
• 討論32-35
• 結(jié)論35-36
• 參考文獻(xiàn)36-40
• 致謝40

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前8條

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  本文關(guān)鍵詞：鼠尾血管內(nèi)皮細(xì)胞分離、培養(yǎng)及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：331875