目的：探討研究分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）并誘導(dǎo)其向軟骨細(xì)胞轉(zhuǎn)化的體外培養(yǎng)方法，同時(shí)從組織形態(tài)學(xué)對(duì)MSCs生長(zhǎng)特征進(jìn)行觀察，為軟骨組織工程的種子細(xì)胞來(lái)源提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：抽取大鼠四肢骨髓，Percoll梯度分離液離心分離結(jié)合貼壁篩選法得到MSCs，在含15％FBS的低糖DMEM培養(yǎng)液中，置于37℃，5％CO2培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)10-14d。傳代后以15％FBS的高糖DMEM培養(yǎng)液(含地塞米松10^-7mol／L，VitC50ug／ml)對(duì)其進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)。觀測(cè)在體外培養(yǎng)條件下MSCs的形態(tài)、生長(zhǎng)特點(diǎn)和誘導(dǎo)培養(yǎng)后軟骨特異性基質(zhì)的表達(dá)情況。 結(jié)果：1、分離獲取了較高純度的MSCs，保持了細(xì)胞的活性。2、MSCs原代培養(yǎng)呈均勻分布的集落樣生長(zhǎng)，呈長(zhǎng)梭形；傳代培養(yǎng)中形態(tài)特性無(wú)明顯變化，細(xì)胞均質(zhì)性明顯提高。3、各代培養(yǎng)中堿性磷酸酶染色均呈陰性；誘導(dǎo)后的細(xì)胞由梭形向多角形、多邊形轉(zhuǎn)變，對(duì)甲苯胺藍(lán)呈現(xiàn)強(qiáng)的異染性反應(yīng)，11型膠原免疫組化陽(yáng)性。 結(jié)論：1、采用Percoll梯度分離液離心分離結(jié)合貼壁篩選法可獲得較高純度和活性的MSCS，是簡(jiǎn)便有效、實(shí)用可行的方法。2... 

【文章來(lái)源】：廣西醫(yī)科大學(xué)廣西壯族自治區(qū)

【文章頁(yè)數(shù)】：62 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一、 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離、體外培養(yǎng)和向軟骨細(xì)胞表型定向分化的實(shí)驗(yàn)研究
    1 、 中文摘要
    2 、 英文摘要
    3 、 前言
    4 、 材料與方法
    5 、 結(jié)果
    6 、 附錄(圖)
    7 、 討論
    8 、 結(jié)論
    9 、 參考文獻(xiàn)
    10 、 致謝
二、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及其在軟骨組織工程中的研究進(jìn)展
    1 、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
    2 、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特點(diǎn)
    3 、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外分離純化、培養(yǎng)擴(kuò)增
    4 、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向軟骨表型的定向分化
    5 、 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞介導(dǎo)的組織工程軟骨構(gòu)建及軟骨缺損的修復(fù)
    6 、 存在問(wèn)題及展望
    7 、 參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表達(dá)軟骨細(xì)胞表型[J]. 尹戰(zhàn)海,劉淼,王金堂,曹峻嶺,鄭鈞.  中國(guó)矯形外科雜志. 2002(06)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在軟骨細(xì)胞培養(yǎng)條件下生物學(xué)特點(diǎn)的觀察[J]. 周強(qiáng),李起鴻,楊柳,段小軍.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(05)
[3]骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向軟骨細(xì)胞表型定向誘導(dǎo)分化的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 夏萬(wàn)堯,商慶新,徐蓉,曹誼林,崔磊,丁小邦.  中華整形外科雜志. 2002(01)
[4]自體骨髓基質(zhì)細(xì)胞與同種異體脫鈣骨基質(zhì)復(fù)合移植修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 丁元洪,張功禮,禹志宏,鄧長(zhǎng)康,劉寶山,施永彥,李偉,張昊.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2001(10)
[5]兔骨髓間質(zhì)干細(xì)胞用于構(gòu)建組織工程軟骨組織的初步報(bào)告[J]. 單玉興,劉一,徐莘香.  中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2001(01)
[6]骨髓基質(zhì)細(xì)胞體外增殖后移植修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 董啟榕,戴漣生,鄭祖根.  中國(guó)矯形外科雜志. 2000(10)
[7]人胚胎骨髓基質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)觀察[J]. 蘇瑞軍,黃紹良,周敦華,李樹濃,梁曉燕.  中國(guó)小兒血液. 1999(01)



本文編號(hào)：3258292