目的:制備新型MIP-2γ/GM-CSF細胞因子融合蛋白,研究其生物學功能。方法:通過基因工程方法構建高表達MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并優(yōu)化發(fā)酵、純化條件。以MTT法和集落形成實驗檢測MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外的促造血增殖活性;以transwell體系檢測融合蛋白對免疫造血細胞的趨化活性。進行動物體內實驗,研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對放療引起的造血損傷的修復作用和對荷瘤小鼠的抗腫瘤效應,并研究了其相關的作用機制。結果:制備了足量的符合生物學功能實驗要求的MIP-2γ/hGM-CSF融合蛋白、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白。體外實驗證實MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有比單用組成因子MIP-2γ或者GM-CSF更強的促造血增殖活性和對免疫細胞的趨化活性。動物體內實驗表明,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對放療引起的造血損傷具有更顯著的治療作用,此外,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白還具有一定的抗腫瘤效應。研究中還首次發(fā)現了MIP-2γ能夠抑制血管生成的新功能。結論:MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有促進造血恢復和增強免疫... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

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【學位級別】：博士

【部分圖文】：

人MPI一YZPCR的產物的電泳分析

軍醫(yī)大學博士學位論文第一部分(二)實驗結果1.PCR克隆人Mlp·2丫、hGM·CSF、mGM·CSF基因序列的鑒定反應產物行2%瓊脂糖凝膠電泳分析，如圖3、4、5所示，PCR反應分別擴增到了270bp、400bp、37obp左右的片段，與設計一致。

R的產物的電泳分析stofhMIP一勿圖4人GM一csFig.4PCRProdMarker;1.DGL2000hM護一勿rfagment2.AlllPlified


本文編號：3256701