目的:制備新型MIP-2γ/GM-CSF細(xì)胞因子融合蛋白,研究其生物學(xué)功能。方法:通過(guò)基因工程方法構(gòu)建高表達(dá)MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并優(yōu)化發(fā)酵、純化條件。以MTT法和集落形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在體外的促造血增殖活性;以transwell體系檢測(cè)融合蛋白對(duì)免疫造血細(xì)胞的趨化活性。進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn),研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對(duì)放療引起的造血損傷的修復(fù)作用和對(duì)荷瘤小鼠的抗腫瘤效應(yīng),并研究了其相關(guān)的作用機(jī)制。結(jié)果:制備了足量的符合生物學(xué)功能實(shí)驗(yàn)要求的MIP-2γ/hGM-CSF融合蛋白、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白。體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有比單用組成因子MIP-2γ或者GM-CSF更強(qiáng)的促造血增殖活性和對(duì)免疫細(xì)胞的趨化活性。動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白對(duì)放療引起的造血損傷具有更顯著的治療作用,此外,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白還具有一定的抗腫瘤效應(yīng)。研究中還首次發(fā)現(xiàn)了MIP-2γ能夠抑制血管生成的新功能。結(jié)論:MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有促進(jìn)造血恢復(fù)和增強(qiáng)免疫... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：131 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

人MPI一YZPCR的產(chǎn)物的電泳分析

軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文第一部分(二)實(shí)驗(yàn)結(jié)果1.PCR克隆人Mlp·2丫、hGM·CSF、mGM·CSF基因序列的鑒定反應(yīng)產(chǎn)物行2%瓊脂糖凝膠電泳分析，如圖3、4、5所示，PCR反應(yīng)分別擴(kuò)增到了270bp、400bp、37obp左右的片段，與設(shè)計(jì)一致。

R的產(chǎn)物的電泳分析stofhMIP一勿圖4人GM一csFig.4PCRProdMarker;1.DGL2000hM護(hù)一勿rfagment2.AlllPlified


本文編號(hào)：3256701