本文關鍵詞：饑餓時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的饑餓條件下機體處于營養(yǎng)物質(zhì)和能量攝入不足或缺乏的狀態(tài),自噬是一個基本的生物學過程,其基本功能之一是使細胞在饑餓和其他形式的脅迫期間能夠消化其自身的胞質(zhì)成分而維持細胞的存活。機體對饑餓狀態(tài)代謝反應的整體調(diào)節(jié)是復雜變化的,且自噬本身也是一個隨時間連續(xù)變化的動態(tài)過程。腦作為神經(jīng)中樞,其由饑餓引起的應激反應具有特殊性。本研究擬經(jīng)自噬體的角度,探討?zhàn)囸I時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響。方法健康雄性SPF級SD大鼠105只,3月齡,體重330~370g,采用分層隨機化法分為3組:正常對照組(C組,n=15)、短期饑餓組(SS組,n=45)和長期饑餓組(LS組,n=45);SS組隨機分為饑餓1d(S1亞組)、2d(S2亞組)、3d(S3亞組)三個亞組(n=15),LS組隨機分為饑餓5d(S5亞組)、7d(S7亞組)、9d(S9亞組)三個亞組(n=15)。饑餓期間大鼠無飼料供應,自由飲水。各組饑餓處理結(jié)束后,采用蘇木素-伊紅(HE)染色觀察腦組織病理學改變,采用透射電子顯微鏡觀察腦組織超微結(jié)構(gòu),采用免疫組織化學染色檢測自噬相關基因LC3與Beclin 1的表達,采用Western blot法測定大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1的表達水平。結(jié)果1 HE染色觀測結(jié)果:C組大鼠腦組織結(jié)構(gòu)完整;與C組比較,SS組腦組織病理學改變不明顯;LS組可見部分神經(jīng)元形態(tài)發(fā)生改變,且隨著饑餓時間的延長,病理改變加重。2透射電子顯微鏡觀測結(jié)果:C組神經(jīng)元超微結(jié)構(gòu)完整;SS組可見部分線粒體輕度腫脹;LS組可見毛細血管內(nèi)皮細胞腫脹,基膜破損,線粒體呈現(xiàn)不同程度的損傷,可見包裹細胞器的自噬體。3免疫組織化學染色結(jié)果:與C組比較,SS組的S1和S2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),S3亞組LC3與Beclin 1表達上調(diào)(P0.05),LS組LC3與Beclin 1表達上調(diào)(P0.01);與SS組比較,LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin 1表達上調(diào)(P0.01)。各亞組間,S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與S1和S2亞組比較,S3亞組LC3與Beclin 1表達上調(diào)(P0.05);S3、S5、S7亞組LC3與Beclin 1表達逐漸上調(diào)(P0.01);與S7亞組比較,S9亞組LC3表達上調(diào)(P0.01),而Beclin 1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 Western blot檢測結(jié)果:與C組比較,SS組的S1和S2亞組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin 1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),S3亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達上調(diào)(P0.01),LS組LC3-Ⅱ與Beclin1表達上調(diào)(P0.01);與SS組比較,LS組大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin 1表達上調(diào)(P0.01)。各亞組間,S1和S2亞組比較大鼠大腦皮質(zhì)LC3-Ⅱ與Beclin1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);與S1和S2亞組比較,S3亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達上調(diào)(P0.01);S3、S5、S7亞組LC3-Ⅱ與Beclin 1表達逐漸上調(diào)(P0.01);與S7亞組比較,S9亞組LC3-Ⅱ表達上調(diào)(P0.01),而Beclin 1表達差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論短期饑餓2天內(nèi)大鼠大腦皮質(zhì)自噬水平未發(fā)生明顯改變,隨著饑餓時間的延長,自噬體數(shù)量增多,長期饑餓狀態(tài)下自噬體數(shù)量的增多可能與自噬功能紊亂有關。
【關鍵詞】：自噬 饑餓時相 大腦皮質(zhì) LC3 Beclin 1
【學位授予單位】：華北理工大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R338
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 引言11-13
• 第1章 饑餓時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響13-39
• 1.1 材料與方法13-21
• 1.1.1 實驗動物13
• 1.1.2 主要試劑13-14
• 1.1.3 主要試劑的配制14-15
• 1.1.4 主要儀器及耗材15-16
• 1.1.5 動物分組16
• 1.1.6 形態(tài)學實驗動物組織的取材與處理16-17
• 1.1.7 大鼠腦組織石蠟切片HE染色17
• 1.1.8 透射電子顯微鏡檢測17-18
• 1.1.9 免疫組織化學染色檢測自噬相關基因LC3與Beclin 1 的表達18-19
• 1.1.10 Western blot測定自噬相關基因LC3與Beclin 1 的表達水平19-21
• 1.1.11 統(tǒng)計學處理21
• 1.2 結(jié)果21-33
• 1.2.1 病理學HE染色觀測結(jié)果21
• 1.2.2 透射電子顯微鏡觀測結(jié)果21-22
• 1.2.3 大鼠大腦皮質(zhì)LC3、Beclin 1 免疫組織化學染色結(jié)果22-23
• 1.2.4 大鼠大腦皮質(zhì)LC3、Beclin 1 的Western blot檢測結(jié)果23-33
• 1.3 討論33-36
• 1.3.1 饑餓模型的建立33
• 1.3.2 營養(yǎng)饑餓條件下的細胞自噬33-34
• 1.3.3 饑餓時相對大鼠大腦皮質(zhì)自噬的影響34-36
• 1.4 結(jié)論36
• 參考文獻36-39
• 第2章 綜述 饑餓狀態(tài)下的細胞自噬39-57
• 2.1 自噬的分類39
• 2.2 自噬發(fā)生的分子機制39-41
• 2.3 細胞自噬的研究方法41-45
• 2.3.1 基于自噬體的形態(tài)學檢測41-42
• 2.3.2 基于自噬流量的動態(tài)檢測42-45
• 2.4 自噬與饑餓45-50
• 2.4.1 饑餓狀態(tài)下細胞自噬的作用45-46
• 2.4.2 饑餓狀態(tài)下自噬信號通路的調(diào)節(jié)機制與酶學基礎46-49
• 2.4.3 分子伴侶介導的自噬與饑餓49-50
• 參考文獻50-57
• 致謝57-58
• 導師簡介58-59
• 作者簡介59-60
• 學位論文數(shù)據(jù)集60

【共引文獻】

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本文編號：323615