利用黑斑雙鰭電鰩構(gòu)建實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力小鼠模型
發(fā)布時(shí)間:2021-06-14 08:20
目的建立符合國(guó)際化的臨床前實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無(wú)力(experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)動(dòng)物模型。方法參照文獻(xiàn)報(bào)道的方法并改進(jìn)后,從電鰩電器官提取乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor,AchR)蛋白純品,并采用SDS凝膠電泳蛋白定性鑒定及BCA法蛋白定量;用純化的蛋白主動(dòng)免疫C57BL/6小鼠,共免疫3次(分別于第1天、第30天、第60天),進(jìn)行EAMG小鼠臨床評(píng)分、體重、血清AchR抗體含量、新斯的明試驗(yàn)、肌電圖等綜合評(píng)價(jià)。結(jié)果 EAMG模型組與佐劑組比較,自第三周開(kāi)始發(fā)病,平均臨床評(píng)分顯著上升(P<0.01);發(fā)病小鼠體重顯著減輕(P<0.01);新斯的明試驗(yàn)陽(yáng)性;血清AchR抗體含量明顯增加(P<0.01);肌電圖重復(fù)電刺激實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性。結(jié)論從黑斑雙鰭電鰩的電器官提取、純化AchR蛋白成功誘導(dǎo)C57BL/6 EAMG小鼠模型,為進(jìn)一步研究重癥肌無(wú)力創(chuàng)造了良好條件。
【文章來(lái)源】:中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2019,27(02)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 方法
1.2.1 AchR的提取
1.2.2 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備及純化AchR蛋白
(1) 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備
(2) 制備羥基磷灰石柱子
(3) 親和純化AchR蛋白
1.2.3 SDS-PAGE分析
1.2.4 EAMG 模型制備及評(píng)價(jià)
(1) EAMG 模型制備
(2) EAMG評(píng)價(jià)及檢測(cè)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 臨床評(píng)分
2.2 體重
2.3 血清中抗AchR抗體
2.4 肌電圖
2.5 新斯的明試驗(yàn)
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重癥肌無(wú)力小鼠模型的建立[J]. 陳國(guó)江,王建安,韓根成,王仁喜,宋倫,池木根,沈倍奮,黎燕. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2006(01)
[2]黑斑雙鰭電鰩(Narcine maculata)電器官ACh受體的分離、純化及其某些特性的研究[J]. 陳麗筠,沈國(guó)光. 動(dòng)物學(xué)研究. 1984(02)
本文編號(hào):3229432
【文章來(lái)源】:中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2019,27(02)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:5 頁(yè)
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
1.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
1.2 方法
1.2.1 AchR的提取
1.2.2 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備及純化AchR蛋白
(1) 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備
(2) 制備羥基磷灰石柱子
(3) 親和純化AchR蛋白
1.2.3 SDS-PAGE分析
1.2.4 EAMG 模型制備及評(píng)價(jià)
(1) EAMG 模型制備
(2) EAMG評(píng)價(jià)及檢測(cè)方法
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
2.1 臨床評(píng)分
2.2 體重
2.3 血清中抗AchR抗體
2.4 肌電圖
2.5 新斯的明試驗(yàn)
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]重癥肌無(wú)力小鼠模型的建立[J]. 陳國(guó)江,王建安,韓根成,王仁喜,宋倫,池木根,沈倍奮,黎燕. 中國(guó)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)報(bào). 2006(01)
[2]黑斑雙鰭電鰩(Narcine maculata)電器官ACh受體的分離、純化及其某些特性的研究[J]. 陳麗筠,沈國(guó)光. 動(dòng)物學(xué)研究. 1984(02)
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