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利用黑斑雙鰭電鰩構(gòu)建實驗性自身免疫性重癥肌無力小鼠模型

發(fā)布時間:2021-06-14 08:20
  目的建立符合國際化的臨床前實驗標準的實驗性自身免疫性重癥肌無力(experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG)動物模型。方法參照文獻報道的方法并改進后,從電鰩電器官提取乙酰膽堿受體(acetylcholine receptor,AchR)蛋白純品,并采用SDS凝膠電泳蛋白定性鑒定及BCA法蛋白定量;用純化的蛋白主動免疫C57BL/6小鼠,共免疫3次(分別于第1天、第30天、第60天),進行EAMG小鼠臨床評分、體重、血清AchR抗體含量、新斯的明試驗、肌電圖等綜合評價。結(jié)果 EAMG模型組與佐劑組比較,自第三周開始發(fā)病,平均臨床評分顯著上升(P<0.01);發(fā)病小鼠體重顯著減輕(P<0.01);新斯的明試驗陽性;血清AchR抗體含量明顯增加(P<0.01);肌電圖重復電刺激實驗陽性。結(jié)論從黑斑雙鰭電鰩的電器官提取、純化AchR蛋白成功誘導C57BL/6 EAMG小鼠模型,為進一步研究重癥肌無力創(chuàng)造了良好條件。 

【文章來源】:中國實驗動物學報. 2019,27(02)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】:5 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 實驗動物
        1.1.2 實驗試劑
        1.1.3 實驗儀器
    1.2 方法
        1.2.1 AchR的提取
        1.2.2 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備及純化AchR蛋白
            (1) 中華眼鏡蛇毒親和層析柱制備
            (2) 制備羥基磷灰石柱子
            (3) 親和純化AchR蛋白
        1.2.3 SDS-PAGE分析
        1.2.4 EAMG 模型制備及評價
            (1) EAMG 模型制備
            (2) EAMG評價及檢測方法
    1.3 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 臨床評分
    2.2 體重
    2.3 血清中抗AchR抗體
    2.4 肌電圖
    2.5 新斯的明試驗
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]重癥肌無力小鼠模型的建立[J]. 陳國江,王建安,韓根成,王仁喜,宋倫,池木根,沈倍奮,黎燕.  中國實驗動物學報. 2006(01)
[2]黑斑雙鰭電鰩(Narcine maculata)電器官ACh受體的分離、純化及其某些特性的研究[J]. 陳麗筠,沈國光.  動物學研究. 1984(02)



本文編號:3229432

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