目的檢測(cè)Renca細(xì)胞exosomes對(duì)CD8⁺T細(xì)胞的激活效應(yīng)以及exosomes負(fù)載的樹(shù)突狀細(xì)胞（DCs）所誘導(dǎo)的CD8⁺T細(xì)胞對(duì)Renca細(xì)胞特異性殺傷作用。方法采用超速離心法從Renca細(xì)胞無(wú)血清上清液中提取出exosomes并鑒定,體內(nèi)通過(guò)流式和ELISA;體外通過(guò)CFSE熒光染色和ELISA檢測(cè)exosomes對(duì)CD8⁺T細(xì)胞的激活效應(yīng)。小鼠骨髓分離出DCs并進(jìn)行體外培養(yǎng),用exosomes沖擊成熟的DCs然后活化CD8⁺T細(xì)胞,測(cè)定其對(duì)Renca、4T1、CT26細(xì)胞的殺傷率。結(jié)果透射電鏡下觀察exosomes是直徑在30～100 nm的盤狀囊泡,Western blot檢測(cè)exosomes高表達(dá)MHC-1和HSP70。Exosomes能在體內(nèi)和體外促進(jìn)CD8⁺T細(xì)胞的增殖和激活效應(yīng)。在體外殺傷實(shí)驗(yàn)中,exosomes沖擊的DCs所誘導(dǎo)的CD8⁺T細(xì)胞相對(duì)于4T1和CT26細(xì)胞,其對(duì)Renca細(xì)胞具有明顯更強(qiáng)的殺傷作用。結(jié)論 Renca細(xì)胞e... 

【文章來(lái)源】：免疫學(xué)雜志. 2019,35(07)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：7 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要細(xì)胞、動(dòng)物、試劑與儀器
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 Exosomes的提取
    1.4 Exosomes的形態(tài)學(xué)觀察
    1.5 Western blot分析
    1.6 流式檢測(cè)CD8+/CD4+T比例
    1.7 磁珠分選CD8+T細(xì)胞
    1.8 CFSE標(biāo)記的CD8+T細(xì)胞的增殖實(shí)驗(yàn)
    1.9 ELISA檢測(cè)IFN-γ水平
    1.1 0 DCs的體外培養(yǎng)
    1.1 1 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)
    1.1 2 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 Exosomes的電鏡形態(tài)
    2.2 Exosomes的蛋白成分分析
    2.3 Exosomes改變了體內(nèi)CD8+/CD4+T細(xì)胞比例
    2.4 Exosomes促進(jìn)了CD8+T細(xì)胞的體外增殖
    2.5 Exosomes在體外促進(jìn)了CD8+T細(xì)胞IFN-γ的分泌
    2.6 Exosomes促進(jìn)了體內(nèi)CD8+T細(xì)胞IFN-γ的分泌
    2.7 DCs的形態(tài)特征
    2.8 負(fù)載exosomes的DCs誘導(dǎo)的CD8+T細(xì)胞的特異性殺傷
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]腫瘤外泌體對(duì)免疫細(xì)胞的作用[J]. 周虎,張麗峰,冷靜.  免疫學(xué)雜志. 2018(10)
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[3]IL-18基因修飾對(duì)肺癌細(xì)胞來(lái)源exosome誘導(dǎo)殺傷腫瘤細(xì)胞作用的影響[J]. 張?jiān)谠?李曉梅,王涓冬,孫建華,姜玉華,潘祥林.  中國(guó)病理生理雜志. 2011(09)
[4]小鼠骨髓源樹(shù)突狀細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)及初步鑒定[J]. 劉錚,代繼宏,符州,馮琳琳.  生物學(xué)雜志. 2011(02)



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