核受體PPARγ結(jié)合小肽的篩選及初步功能鑒定
發(fā)布時間:2021-06-12 00:17
過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs)是一類由配體激活的轉(zhuǎn)錄因子,屬于核受體超家族的成員。PPARs存在三種亞型:PPARα、PPARβ/δ和PPARγ。其中PPARγ可由多種脂肪酸及其代謝產(chǎn)物激活,在機體糖類和脂類代謝中起到重要調(diào)節(jié)作用,與2型糖尿病、動脈粥樣硬化、高血壓等多種代謝性疾病以及炎癥、腫瘤等的發(fā)生密切相關(guān)。目前,PPARγ作為多種疾病治療的一個重要靶分子,正受到越來越多的關(guān)注。近年來發(fā)展較快的噬菌體肽庫篩選技術(shù)正廣泛應用于小分子藥物設計、重組疫苗研制、抗病毒藥物篩選及細胞信號傳導研究等領(lǐng)域,其篩選的共同點是釣取與蛋白(如抗體,受體,酶)特異性結(jié)合的配基。這種篩選功能性短肽的策略對于PPARγ與其作用分子的研究有很大的借鑒意義。本研究表達純化了PPARγ配體結(jié)合域(ligand bind- ing domain, LBD)的his融合蛋白,并以之為靶,從噬菌體肽庫中篩選結(jié)合PPARγ受體的短肽,對短肽分子進行了初步鑒定,為進一步研究PPARγ作用的分子機理以及開發(fā)以PPARγ為作用靶...
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
重組PPARγ-LBD蛋白的SDS-PAGE電泳分析
PPARγ-LBD的純化結(jié)果
圖 2 誘導溫度對重組蛋白表達的影響誘導前的 pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3);pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 37℃誘導 4hr 的表達pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 20℃誘導 12hr 的表37℃誘導表達菌超聲破碎的上清;37℃誘導表達菌超聲破碎的沉淀;20℃誘導表達菌超聲破碎的上清;20℃誘導表達菌超聲破碎的沉淀;純化后的重組 PPARγ-LBD 蛋白;小分子量蛋白標準
本文編號:3225555
【文章來源】:中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市
【文章頁數(shù)】:67 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
重組PPARγ-LBD蛋白的SDS-PAGE電泳分析
PPARγ-LBD的純化結(jié)果
圖 2 誘導溫度對重組蛋白表達的影響誘導前的 pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3);pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 37℃誘導 4hr 的表達pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 20℃誘導 12hr 的表37℃誘導表達菌超聲破碎的上清;37℃誘導表達菌超聲破碎的沉淀;20℃誘導表達菌超聲破碎的上清;20℃誘導表達菌超聲破碎的沉淀;純化后的重組 PPARγ-LBD 蛋白;小分子量蛋白標準
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