兔脂肪組織來源干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法與鑒定
本文關(guān)鍵詞:兔脂肪組織來源干細(xì)胞分離培養(yǎng)方法與鑒定,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:目的 建立一種簡單高效的兔脂肪組織來源干細(xì)胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)的體外分離培養(yǎng)方法,使在兔模型中脂肪組織來源干細(xì)胞的提取方法更加簡便而且高效,為組織工程提供充足的干細(xì)胞來源‘。方法兔麻醉后在無菌條件下分離兔腹股溝皮下脂肪組織,剪碎成脂肪顆粒后采用0.1%Ⅰ型膠原酶37℃恒溫條件下震蕩消化,用含10%胎牛血清(FBS)及1%雙抗(青霉素、鏈霉素)的高糖基礎(chǔ)培養(yǎng)基(DMEM)在細(xì)胞培養(yǎng)箱中進(jìn)行貼壁培養(yǎng)兔ADSCs,并對其細(xì)胞的形態(tài)、體外增殖能力進(jìn)行觀察統(tǒng)計,繪制細(xì)胞增殖曲線,并對其經(jīng)過誘導(dǎo),對其成骨、成脂肪、成軟骨能力的分化及表面標(biāo)記基因表達(dá)進(jìn)行分析研究。結(jié)果此方法在體外分離培養(yǎng)的兔ADSCs具有良好的細(xì)胞形態(tài)和極強的增殖能力,經(jīng)誘導(dǎo)分化,其具有成脂。成軟骨及成骨分化潛能,兔第三代ADSCs表面標(biāo)記CD34、CD105陽性,S c a—1高表達(dá),不表達(dá)C D 45及SSEA-1。結(jié)論利用兔腹股溝皮下脂肪組織,剪碎后經(jīng)Ⅰ型膠原酶消化,進(jìn)行貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞量大、質(zhì)優(yōu),并且既具有良好干細(xì)胞特性,又具有極強體外增殖能力,使兔模型中分離和培養(yǎng)脂肪組織來源干細(xì)胞的方法更加簡便并且高效,為組織工程研究中提供一種優(yōu)質(zhì)并且無倫理學(xué)問題的種子細(xì)胞,并且解決了組織工程中種子細(xì)胞需求量大、提取簡便的難題。
【關(guān)鍵詞】:兔 ADSCs 分化潛能 表面標(biāo)記 基因表達(dá) 組織工程
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R329
【目錄】:
- 個人簡歷3-5
- 中文摘要5-6
- 英文摘要6-8
- 前言8-12
- 參考文獻(xiàn)11-12
- 實驗材料與方法12-24
- 結(jié)果24-33
- 討論33-39
- 參考文獻(xiàn)35-39
- 文獻(xiàn)綜述39-57
- 參考文獻(xiàn)51-57
- 致謝57-58
- 攻讀碩士期間論文發(fā)表情況58
- 攻讀碩士期間參與申請課題58-59
- 附件59-62
【參考文獻(xiàn)】
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,本文編號:322533
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