目的以卡波姆971p輔以國產(chǎn)白喉、百日咳、破傷風(fēng)滅活疫苗及Poly（I:C）配制成新型佐劑,與DNA疫苗pVAX-Zika-E聯(lián)合免疫BALB/c小鼠,觀察新型卡波姆佐劑對DNA疫苗抗原的適應(yīng)性及免疫應(yīng)答能力。方法 PCR擴(kuò)增ZIKA E蛋白基因,連接到pVAX-1載體上,構(gòu)建表達(dá)ZIKA E蛋白的DNA疫苗。將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293細(xì)胞,采用Western blot檢測目的蛋白的表達(dá)。用配制的佐劑與表達(dá)ZIKA E蛋白的DNA疫苗聯(lián)合免疫BALB/c小鼠。通過淋巴細(xì)胞增殖試驗(yàn)和特異性抗體檢測驗(yàn)證新型佐劑的增強(qiáng)免疫效果。結(jié)果 Western blot結(jié)果顯示所構(gòu)建的DNA疫苗pVAX-ZIKA-E表達(dá)56×10³目的蛋白。用重組疫苗做動物試驗(yàn),免疫35 d時佐劑組淋巴細(xì)胞增殖刺激組刺激指數(shù)是無佐劑對照組的1.30～1.55倍,特異抗體水平(A₄₅₀值)是無佐劑組對照組的1.27～1.50倍。結(jié)論 pVAX-ZIKA-E DNA疫苗輔以新型卡波姆佐劑免疫小鼠可增強(qiáng)機(jī)體對該疫苗的免疫應(yīng)答能力。 

【文章來源】：中國病原生物學(xué)雜志. 2019,14(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    1 材料
        1.1 主要試劑
        1.2 細(xì)胞、菌株及病毒
        1.3 實(shí)驗(yàn)動物
    2 方法
        2.1 ZIKA E基因合成和PCR擴(kuò)增
        2.2 重組質(zhì)粒的構(gòu)建
        2.3 表達(dá)ZIKA E蛋白DNA疫苗的構(gòu)建
        2.4 動物免疫試驗(yàn)
            2.4.1 佐劑配制
            2.4.2 動物分組及免疫
        2.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié) 果
    1 目的基因PCR擴(kuò)增
    2 重組pVAX-ZIKA-E質(zhì)粒構(gòu)建及鑒定
    3 Western Blot 檢測ZIKA E蛋白的表達(dá)
    4 DNA疫苗聯(lián)合新型佐劑免疫效果
討 論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[3]疫苗佐劑最新研究進(jìn)展[J]. 周洋,耿興超,汪巨峰,李波.  中國新藥雜志. 2013(01)
[4]口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞TLR3表達(dá)及其配體poly（I:C）的誘導(dǎo)凋亡作用[J]. 羅清瓊,陳萬濤,胡水清,陳福祥.  上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2011(01)



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