用DNAstar軟件包分別從HCMV、HSV-1、HSV-2和EBV的DNA聚合酶高保守基因區(qū)中設(shè)計一對共享序列引物，根據(jù)四種基因產(chǎn)物序列選擇Sma I 和 BamH I作為限制性內(nèi)切酶，對PCR產(chǎn)物進(jìn)行酶切，從而做到在一個方法中，經(jīng)一次PCR擴(kuò)增并結(jié)合酶切即可區(qū)分四種病毒的感染。應(yīng)用這一方法，分別檢測了臨床高危感染者血標(biāo)本、孕期可疑宮頸分泌物和尿配對標(biāo)本共99例，四種病毒擴(kuò)增的產(chǎn)物分別是HCMV 594bp、HSV-1與 HSV-2均為522bp、EBV 528bp。HSV-1被SmaI酶切形成478和44 bp兩個片段，但沒有BamH I酶切位點；HSV-2被BamH I酶切后形成224和298bp兩個片段，沒有SmaI酶切位點；EBV各有一個SmaI和 BamH 酶切位點，分別切成101與427，246和282bp 四個片段；HCMV沒有兩種酶切位點。經(jīng)Southern印記、CC法金標(biāo)準(zhǔn)對比、原位雜交和與單一四種PCR試劑進(jìn)行了驗證和評估，結(jié)果表明，單一PCR試劑盒和共享引物PCR酶切兩種試劑的檢測敏感性無明顯的差異（X2 =0.29, P>0.05），符合率達(dá)85.7%。... 

【文章來源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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前 言
材料與方法
結(jié) 果
討 論
小 結(jié)
附 表
"><參考文獻(xiàn)>
致 謝
綜 述
"><參考文獻(xiàn)>



本文編號：3159289