目的研究丙咪嗪對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小鼠單核巨噬細(xì)胞（RAW264.7）NLRP3炎癥小體激活的影響并探討其可能的作用機(jī)制。方法 CCK-8檢測(cè)丙咪嗪對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響;用不同濃度丙咪嗪預(yù)先處理RAW264.7細(xì)胞2 h后再用LPS處理細(xì)胞8 h,Western blot法檢測(cè)酸性鞘磷脂酶（ASM）、NLRP3、caspase-1、白細(xì)胞介素（IL）-1β和IL-18的蛋白表達(dá)水平;細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)神經(jīng)酰胺（Cer）的含量變化;ELISA法檢測(cè)炎性因子IL-1β和IL-18的釋放水平。結(jié)果與對(duì)照組相比,LPS（1 mg/L）能增加RAW264.7細(xì)胞ASM的蛋白表達(dá)和Cer的含量（P<0.01）;上調(diào)細(xì)胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)水平以及細(xì)胞上清液IL-1β和IL-18的釋放水平（P<0.01）。而經(jīng)丙咪嗪預(yù)先處理能夠顯著抑制LPS所致ASM和Cer的改變（P<0.01）;可明顯抑制細(xì)胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)以及細(xì)胞上清液中IL-1β和IL-18的釋放（P<0.... 

【文章來(lái)源】：安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2019,54(07)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 細(xì)胞
        1.1.2 主要藥品與試劑
        1.1.3 儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)、炎癥模型的構(gòu)建
        1.2.2 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活性
        1.2.3 Western blot法檢測(cè)ASM、NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18的蛋白表達(dá)
        1.2.4 ELISA法測(cè)定RAW264.7細(xì)胞上清液中IL-1β和IL-18含量
        1.2.5 免疫熒光技術(shù)檢測(cè)Cer表達(dá)
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 丙咪嗪對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性的影響
    2.2 丙咪嗪對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中NLRP3、caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表達(dá)的影響
    2.3 丙咪嗪對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞釋放IL-1β和IL-18的影響
    2.4 丙咪嗪對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞中ASM蛋白表達(dá)和Cer含量的影響
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-22靶向抑制NLRP3基因?qū)谛牟?nèi)皮細(xì)胞炎癥損傷的保護(hù)作用[J]. 胡波,張曉剛,李德才.  安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(05)



本文編號(hào)：3158912