目的構(gòu)建含有人血管內(nèi)皮生長因子（human Vascular endothelial growth factor,hVEGF121）和人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-4（human Bone morphogenesia protein-4,hBMP-4）兩基因的真核雙表達質(zhì)粒,并鑒定。方法首先將hVEGF121通過定向克隆至真核雙表達質(zhì)粒pIRES一個多克隆位點中,命名為pIRES-hVEGF121。再將hBMP-4定向克隆至穿梭質(zhì)粒pShuttle CMV上,構(gòu)建pShuttle CMV-hBMP-4重組穿梭質(zhì)粒,最后通過重組穿梭質(zhì)粒將hBMP-4定向克隆至真核雙表達質(zhì)粒pIRES-hVEGF121上,完成真核雙表達載體pIRES- hVEGF121/hBMP-4的構(gòu)建,并作酶切鑒定。轉(zhuǎn)染COS-7細胞,提取總RNA和總蛋白,分別進行RT-PCR檢測其轉(zhuǎn)錄和Western blot檢測其蛋白表達。結(jié)果酶切證明pIRES-hVEGF121真核表達載體構(gòu)建正確;酶切證明pShuttle CMV-hBMP-4穿梭質(zhì)粒構(gòu)建正確;酶切證明真核雙表達載體pIRESh-VEGF121/hBMP-4構(gòu)建正確;RT... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1 前言
2 材料與方法
3. 結(jié)果
4. 討論
5. 結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
綜述


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3152316