目的:探討人胚胎干細(xì)胞源神經(jīng)球條件培養(yǎng)液（human embryonic stem cell-derived neurospheres conditioned medium,h ESCN-CM）對(duì)施萬(wàn)細(xì)胞增殖和遷移的影響及其潛在的機(jī)制。方法:取3～5 d SD大鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng),分離純化施萬(wàn)細(xì)胞,用免疫熒光染色法進(jìn)行鑒定。分別用0%、50%和100%h ESCN-CM刺激施萬(wàn)細(xì)胞,CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖,劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)Nt3、Vegf、Ngf、Bfgf、Igf-1等mRNA的表達(dá)。結(jié)果:免疫熒光染色結(jié)果顯示,施萬(wàn)細(xì)胞S100特異性表達(dá)可達(dá)99%。CCK-8實(shí)驗(yàn)顯示,與0%h ESCN-CM相比,50%h ESCN-CM刺激后施萬(wàn)細(xì)胞增殖明顯增強(qiáng),100%h ESCN-CM刺激后施萬(wàn)細(xì)胞增殖明顯降低（P均<0. 05）。劃痕實(shí)驗(yàn)顯示,刺激6 h,與0%h ESCN-CM刺激后施萬(wàn)細(xì)胞相比,50%和100%h ESCN-CM刺激后施萬(wàn)細(xì)胞遷移明顯增強(qiáng)（P <0. 05）;刺激12 h,50%h ESCN-CM刺激后施萬(wàn)細(xì)胞遷移明顯增強(qiáng)（P <... 

【文章來(lái)源】：江蘇大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2019,29(03)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 原代施萬(wàn)細(xì)胞的分離純化
    1.3 免疫熒光染色檢測(cè)施萬(wàn)細(xì)胞特定蛋白的表達(dá)
    1.4 人胚胎干細(xì)胞源神經(jīng)球的培養(yǎng)
    1.5 h ESCN-CM的制備
    1.6 CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性
    1.7 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移
    1.8 實(shí)時(shí)熒光定量PCR （qRT-PCR） 檢測(cè)施萬(wàn)細(xì)胞多種mRNA表達(dá)
    1.9 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠施萬(wàn)細(xì)胞形態(tài)和鑒定
    2.2 hESCN-CM對(duì)施萬(wàn)細(xì)胞增殖能力的影響
    2.3 h ESCN-CM對(duì)施萬(wàn)細(xì)胞遷移能力的影響
    2.4 hESCN-CM對(duì)施萬(wàn)細(xì)胞多種細(xì)胞因子表達(dá)的影響
3 討論



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