目的:探討人胚胎干細胞源神經(jīng)球條件培養(yǎng)液（human embryonic stem cell-derived neurospheres conditioned medium,h ESCN-CM）對施萬細胞增殖和遷移的影響及其潛在的機制。方法:取3～5 d SD大鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng),分離純化施萬細胞,用免疫熒光染色法進行鑒定。分別用0%、50%和100%h ESCN-CM刺激施萬細胞,CCK-8實驗檢測細胞增殖,劃痕實驗檢測細胞遷移,實時熒光定量PCR檢測Nt3、Vegf、Ngf、Bfgf、Igf-1等mRNA的表達。結(jié)果:免疫熒光染色結(jié)果顯示,施萬細胞S100特異性表達可達99%。CCK-8實驗顯示,與0%h ESCN-CM相比,50%h ESCN-CM刺激后施萬細胞增殖明顯增強,100%h ESCN-CM刺激后施萬細胞增殖明顯降低（P均<0. 05）。劃痕實驗顯示,刺激6 h,與0%h ESCN-CM刺激后施萬細胞相比,50%和100%h ESCN-CM刺激后施萬細胞遷移明顯增強（P <0. 05）;刺激12 h,50%h ESCN-CM刺激后施萬細胞遷移明顯增強（P <... 

【文章來源】：江蘇大學學報(醫(yī)學版). 2019,29(03)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 原代施萬細胞的分離純化
    1.3 免疫熒光染色檢測施萬細胞特定蛋白的表達
    1.4 人胚胎干細胞源神經(jīng)球的培養(yǎng)
    1.5 h ESCN-CM的制備
    1.6 CCK-8實驗檢測細胞增殖活性
    1.7 劃痕實驗檢測細胞遷移
    1.8 實時熒光定量PCR （qRT-PCR） 檢測施萬細胞多種mRNA表達
    1.9 統(tǒng)計學方法
2 結(jié)果
    2.1 大鼠施萬細胞形態(tài)和鑒定
    2.2 hESCN-CM對施萬細胞增殖能力的影響
    2.3 h ESCN-CM對施萬細胞遷移能力的影響
    2.4 hESCN-CM對施萬細胞多種細胞因子表達的影響
3 討論



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