目的探討硝苯地平對(duì)ApoE-/-小鼠RAW264.7巨噬細(xì)胞源性膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)的影響。方法 8周齡左右ApoE-/-小鼠16只,用高脂飼料喂養(yǎng)作為模型,按完全隨機(jī)分組法分為對(duì)照組（n=8）和硝苯地平組（n=8）。將[3H]-膽固醇標(biāo)記的荷脂RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞注入小鼠腹腔,24、48 h時(shí)取血液標(biāo)本,酶法檢測(cè)血漿總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-c）和高密度脂蛋白膽固醇（HDL-c）的濃度。處死后取小鼠肝臟和小腸,實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)肝臟及小腸ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、LXRα基因的mRNA表達(dá),Western blot檢測(cè)其蛋白表達(dá)。同時(shí),收集48 h小鼠糞便,進(jìn)行閃爍液計(jì)數(shù),分別比較2組[3H]的含量。結(jié)果與對(duì)照組相比,經(jīng)硝苯地平處理組血漿血脂蛋白水平均無(wú)明顯變化（P>0.05）;血漿24、48 h閃爍值較對(duì)照組分別增加37.02%、22.72%（P<0.05）,糞便[3H]閃爍值較對(duì)照組增加43.18%（P<0.05）;硝苯地平組ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、LXRα基因的mRNA和蛋白的表達(dá)均有明顯升高。結(jié)論... 

【文章來(lái)源】：第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2014,36(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

ApoE－/－小鼠血漿(A)與糞便(B)中閃爍值比較

喙鼗?騧ＲNA的表達(dá)硝苯地平組肝臟與小腸的膽固醇相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)基因ABCA1、ABCG1、SＲ-BⅠ、LXＲα的表達(dá)較對(duì)照組均明顯增加(P＜0．05，圖2)。2．4硝苯地平增強(qiáng)膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白表達(dá)硝苯地平組肝臟與小腸的膽固醇相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCA1、ABCG1、SＲ-BⅠ、LXＲα的表達(dá)均較對(duì)照組明顯增加，且肝臟的表達(dá)較小腸強(qiáng)(圖3)。1234ABCA1（254×103）→ABCA2（76×103）→SR螄BⅠ（61×103）→LXRα（50×103）→GAPDH（36×103）→1:對(duì)照組肝臟;2:硝苯地平組肝臟;3:對(duì)照組小腸;4:硝苯地平組小腸圖3Westernblot檢測(cè)硝苯地平對(duì)ApoE－/－小鼠ＲAW264．7巨噬細(xì)胞源性膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響3討論膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)是機(jī)體排出過(guò)多膽固醇的唯一途徑，也是機(jī)體抗動(dòng)脈粥樣硬化最重要的機(jī)制之一。其主要過(guò)程包括將多余的膽固醇經(jīng)轉(zhuǎn)運(yùn)體如ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)子A1、G1和清道夫受體B族Ⅰ型(SＲ-BⅠ)等介導(dǎo)從外周細(xì)胞流出，轉(zhuǎn)移至HDL，隨血液循環(huán)至肝臟，與肝細(xì)胞表面HDL受體如SＲ-BⅠ結(jié)合，被選擇性攝取后轉(zhuǎn)變?yōu)槟懼猁}，繼而經(jīng)由糞便排出體外。硝苯地平是一種長(zhǎng)效L-型鈣通道阻滯劑，可以抑制高血壓患者動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)展。文獻(xiàn)［13］研究顯示，硝苯地平能減緩ApoE－/－小鼠動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展。載脂蛋白E是清除乳糜微粒和極低密度脂蛋白受體的配體，因此，缺乏ApoE則會(huì)導(dǎo)致血液循環(huán)中富含膽固醇物質(zhì)累積而更加容易引起動(dòng)脈粥樣硬化病灶形成。ApoE－/－小鼠是動(dòng)脈粥樣硬化較好的模型。為檢測(cè)硝苯地平的抗動(dòng)脈粥樣硬化作用是否與增強(qiáng)小鼠ＲAW264．7巨噬細(xì)胞的膽固醇逆向轉(zhuǎn)運(yùn)功能有關(guān)，在本研究中，我們以ApoE－/－小鼠為動(dòng)物模型，采用［3H］同位素法研究動(dòng)脈粥樣硬化病變中膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)。


本文編號(hào)：3098291