發(fā)布時(shí)間：2021-03-24 14:43

　　[目的]：構(gòu)建蛋白A-PKCε（protein kinase C, PKCε）催化活性結(jié)構(gòu)域融合蛋白表達(dá)載體，在大腸桿菌中表達(dá)并檢測(cè)活性。 [方法]：把兔PKCε催化活性結(jié)構(gòu)域編碼序列DNA插入原核表達(dá)載體pRIT5中。轉(zhuǎn)化入大腸桿菌后，優(yōu)化蛋白A-PKCε催化活性結(jié)構(gòu)域融合蛋白表達(dá)條件，用Western blot方法鑒定檢測(cè)，并用PKC活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)其活性。 [結(jié)果]：限制酶切確認(rèn)構(gòu)建的重組的蛋白A-PKCε催化活性結(jié)構(gòu)域表達(dá)載體，于大腸桿菌DM1中，在25℃表達(dá)融合蛋白的產(chǎn)量最高，經(jīng)活性測(cè)定有蛋白激酶活性。 [結(jié)論]：成功的在大腸桿菌中表達(dá)了具有蛋白激酶活性的蛋白A-PKCε催化活性結(jié)構(gòu)域融合蛋白，為進(jìn)一步研究PKCε介導(dǎo)的信號(hào)傳導(dǎo)通路的研究提供了一個(gè)基礎(chǔ)。 

【文章來源】：昆明醫(yī)科大學(xué)云南省

【文章頁(yè)數(shù)】：47 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
一 論文
    1 中文摘要
    2 英文摘要
    3 前言
    4 材料與方法
    5 結(jié)果
    6 討論
    7 結(jié)論
    8 參考文獻(xiàn)
    9 中文詳細(xì)摘要
    10 英語(yǔ)詳細(xì)摘要
    11 致謝
二、 綜述


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PKCε與Lck在細(xì)胞內(nèi)直接相互作用的熒光共振能量轉(zhuǎn)移證據(jù)[J]. 曹西南,平佩佩,宋昌旭.  中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào). 2002(05)



本文編號(hào)：3097906