廣譜抗LPS-McAb的交叉反應(yīng)性及內(nèi)毒素定量雙抗體夾心ELISA的建立
發(fā)布時間:2021-03-20 08:46
脂多糖(LPS)是革蘭氏陰性菌外膜的主要組成部分,小劑量的LPS即可引起廣泛的生物學(xué)反應(yīng)。臨床上約65%敗血癥是由革蘭氏陰性菌引起的,死亡率達(dá)22.7%~40%。長期以來,臨床實(shí)驗(yàn)診斷內(nèi)毒素血癥多采用鱟試驗(yàn)法(LT),由于鱟試劑自身的非特異性及血漿中諸多因素的影響,盡管多年來進(jìn)行了許多改進(jìn),特異性仍不能令人滿意。ELISA方法是臨床實(shí)驗(yàn)診斷中應(yīng)用最為廣泛的方法之一,但在內(nèi)毒素檢測方面,雖有少數(shù)文獻(xiàn)報道,但由于結(jié)果不滿意而未能實(shí)際應(yīng)用,其主要的原因是難以獲得具有廣泛交叉反應(yīng)性的內(nèi)毒素單抗;其次,內(nèi)毒素包被微板比較困難。本研究是利用本科研制的兩株具有廣泛交叉反應(yīng)性的內(nèi)毒素單抗探索合適條件,首次建立檢測內(nèi)毒素的雙抗體夾心ELISA方法,旨在為臨床提供一個簡單快速、特異性強(qiáng)、敏感性高的內(nèi)毒素檢測方法。 本研究的內(nèi)容主要有三部分: 一 1.雜交瘤細(xì)胞腹水產(chǎn)生影響因素的觀察 為了獲得大量的雜交瘤腹水,我們對預(yù)處理小鼠的佐劑種類。 小鼠類型和雜交瘤細(xì)胞系等因素對腹水產(chǎn)生的影響進(jìn)行了觀察。 結(jié)果:①用降植烷與福氏不完全佐劑預(yù)處理小鼠比液體石臘效果 ...
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
一、 LPS的基本結(jié)構(gòu)和抗原性變化
二、 抗LPS McAb的研究進(jìn)展及其應(yīng)用
三、 細(xì)菌內(nèi)毒素的產(chǎn)生,作用機(jī)理及生物學(xué)效應(yīng)
四、 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測進(jìn)展
五、 血漿內(nèi)毒素測定的臨床意義
研究內(nèi)容
第一部分 LPS抗體的制備及純化
材料與方法
結(jié)果
討論
第二部分 抗LPS-McAb交叉反應(yīng)性鑒定
材料與方法
結(jié)果
討論
第三部分 內(nèi)毒素定量雙抗體夾心ELISA法的建立及初步應(yīng)用
材料與方法
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]廣譜抗LPSmAb的生物學(xué)活性[J]. 馬越云,蘇明權(quán),丁振若,于文彬. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2000(10)
[2]紫外處理聚苯乙烯微孔板的ELISA法檢測抗原[J]. 李晨旭,劉洪陽. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 1998(01)
[3]抗LPS-HDL McAb的交叉反應(yīng)性[J]. 馬越云,丁振若,于文彬,蘇明權(quán),穆士杰. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1997(04)
[4]阻塞性黃疸患者血漿內(nèi)毒素和血清腫瘤壞死因子α水平的研究[J]. 張玉晶,王占民,呂曉霞. 山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 1997(03)
[5]肝硬變血漿內(nèi)毒素與一氧化氮水平的改變及關(guān)系的研究[J]. 任錫玲,姚希賢. 新消化病學(xué)雜志. 1997(06)
[6]革蘭陰性桿菌敗血癥132例臨床分析[J]. 史云麗. 中國實(shí)用內(nèi)科雜志. 1996(09)
[7]敗血癥診斷與治療的進(jìn)展[J]. 董作仁,羅建民,呂風(fēng)珍. 中國實(shí)用內(nèi)科雜志. 1996(09)
[8]丙型肝炎內(nèi)毒素的檢測及臨床意義[J]. 于海波,宋為蕓. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 1996(02)
[9]S minnesota Re菌粗糙型脂多糖的提取純化及鑒定[J]. 劉曉波,黃策,嚴(yán)共華. 臨床檢驗(yàn)雜志. 1995(05)
[10]肝病患者276例血漿內(nèi)毒素檢測的臨床意義[J]. 張蓉,葉維法. 臨床肝膽病雜志. 1989(04)
本文編號:3090715
【文章來源】:中國人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)陜西省 211工程院校
【文章頁數(shù)】:70 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮寫詞表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
一、 LPS的基本結(jié)構(gòu)和抗原性變化
二、 抗LPS McAb的研究進(jìn)展及其應(yīng)用
三、 細(xì)菌內(nèi)毒素的產(chǎn)生,作用機(jī)理及生物學(xué)效應(yīng)
四、 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測進(jìn)展
五、 血漿內(nèi)毒素測定的臨床意義
研究內(nèi)容
第一部分 LPS抗體的制備及純化
材料與方法
結(jié)果
討論
第二部分 抗LPS-McAb交叉反應(yīng)性鑒定
材料與方法
結(jié)果
討論
第三部分 內(nèi)毒素定量雙抗體夾心ELISA法的建立及初步應(yīng)用
材料與方法
結(jié)果
討論
小結(jié)
致謝
參考文獻(xiàn)
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]廣譜抗LPSmAb的生物學(xué)活性[J]. 馬越云,蘇明權(quán),丁振若,于文彬. 第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2000(10)
[2]紫外處理聚苯乙烯微孔板的ELISA法檢測抗原[J]. 李晨旭,劉洪陽. 白求恩醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 1998(01)
[3]抗LPS-HDL McAb的交叉反應(yīng)性[J]. 馬越云,丁振若,于文彬,蘇明權(quán),穆士杰. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1997(04)
[4]阻塞性黃疸患者血漿內(nèi)毒素和血清腫瘤壞死因子α水平的研究[J]. 張玉晶,王占民,呂曉霞. 山東醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 1997(03)
[5]肝硬變血漿內(nèi)毒素與一氧化氮水平的改變及關(guān)系的研究[J]. 任錫玲,姚希賢. 新消化病學(xué)雜志. 1997(06)
[6]革蘭陰性桿菌敗血癥132例臨床分析[J]. 史云麗. 中國實(shí)用內(nèi)科雜志. 1996(09)
[7]敗血癥診斷與治療的進(jìn)展[J]. 董作仁,羅建民,呂風(fēng)珍. 中國實(shí)用內(nèi)科雜志. 1996(09)
[8]丙型肝炎內(nèi)毒素的檢測及臨床意義[J]. 于海波,宋為蕓. 中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志. 1996(02)
[9]S minnesota Re菌粗糙型脂多糖的提取純化及鑒定[J]. 劉曉波,黃策,嚴(yán)共華. 臨床檢驗(yàn)雜志. 1995(05)
[10]肝病患者276例血漿內(nèi)毒素檢測的臨床意義[J]. 張蓉,葉維法. 臨床肝膽病雜志. 1989(04)
本文編號:3090715
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