AT-Ⅲ是血漿中抑制凝血酶的關(guān)鍵物質(zhì)，是目前公認(rèn)的DIC早期診斷指標(biāo)，同時(shí)AT-Ⅲ對(duì)DIC具有預(yù)防和治療作用。制備高特異性、高親和性的抗AT-Ⅲ單克隆抗體是建立AT-Ⅲ含量ELISA測(cè)定法和進(jìn)行AT-Ⅲ純化的前提條件，為此我們研制抗AT-Ⅲ的單克隆抗體，以期為上述工作奠定基礎(chǔ)。 從人體血漿中提取較高純度的抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）的，通過(guò)低溫乙醇處理血漿，得到的沉淀經(jīng)肝素-瓊脂糖兩次親和層析，并透析、濃縮獲得AT-Ⅲ的初品。用此方法提純的AT-Ⅲ經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳分析，顯示所提取的AT-Ⅲ為單一成分。從血漿開(kāi)始計(jì)算的AT-Ⅲ回收率為8.0％，比活性為7.7IU/mg。 本研究采用常規(guī)法進(jìn)行小鼠免疫和細(xì)胞融合。SP2/0細(xì)胞和免疫脾細(xì)胞按1：10比例融合，融合劑PEG分子量為1500，陽(yáng)性克隆篩選采用三步進(jìn)行。首先檢測(cè)小鼠Ig，陽(yáng)性孔用我們提取的AT-Ⅲ進(jìn)行篩選，最后用AT-Ⅲ標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行特異性抗體測(cè)定。本次實(shí)驗(yàn)共免疫小鼠4只，融合率為92.2％，陽(yáng)性率為5.8％。獲得三株分泌抗人抗凝血酶Ⅲ的雜交瘤細(xì)胞株D5、E2、F6，免疫球蛋白的類型為IgG₁型。 ... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
英文摘要
前言
抗-人抗凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）單克隆抗體的研制及其初步應(yīng)用
    一 人抗凝血酶Ⅲ的分離純化
    二 抗-人凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）單克隆抗體的研制
    三 抗-人凝血酶Ⅲ（AT-Ⅲ）單克隆抗體的初步應(yīng)用
討論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3086587