對(duì)乙酰氨基酚誘發(fā)小鼠肝臟黑化機(jī)制及其無(wú)脊椎動(dòng)物快速檢測(cè)模型
本文關(guān)鍵詞:對(duì)乙酰氨基酚誘發(fā)小鼠肝臟黑化機(jī)制及其無(wú)脊椎動(dòng)物快速檢測(cè)模型,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:對(duì)乙酰氨基酚(APAP)是臨床廣泛使用的高效解熱鎮(zhèn)痛類非處方藥。隨意性和復(fù)方使用過(guò)量APAP類藥物引起的肝毒性,在包括美國(guó)在內(nèi)的許多國(guó)家已經(jīng)成為急性肝衰竭(ALF)的主要原因之一。本文以哺乳類小鼠以及無(wú)脊椎模式動(dòng)物家蠶為模型,發(fā)現(xiàn)了APAP誘導(dǎo)小鼠ALF發(fā)生前出現(xiàn)的肝臟黑化現(xiàn)象,進(jìn)一步在家蠶體內(nèi)觀察到具有時(shí)間和劑量效應(yīng)的APAP誘導(dǎo)的體表黑化現(xiàn)象,并以解毒代謝組織脂肪體模擬小鼠肝臟復(fù)制出APAP誘發(fā)的ALF,系統(tǒng)研究和平行比較了兩種動(dòng)物模型APAP誘發(fā)的黑化作用生化機(jī)制。相關(guān)結(jié)果如下:1 APAP引起家蠶脂肪體與小鼠肝臟相似的急性損傷家蠶皓月品種5齡48 h幼蟲(chóng),以及體重20 g左右的ICR小鼠,經(jīng)口給藥APAP后0.5 h-2 h,HPLC方法在小鼠循環(huán)血液(血漿)與肝臟,家蠶循環(huán)血淋巴(血漿)以及脂肪體中追蹤到APAP原藥快速出現(xiàn),并且都呈現(xiàn)典型的時(shí)間/劑量效應(yīng),其中家蠶無(wú)論是血漿還是脂肪體中原藥的含量均顯著高于小鼠血漿和肝臟。經(jīng)口給藥APAP后16 h,組織HE染色切片觀察結(jié)果表明,150 mg/kg以上劑量誘導(dǎo)了小鼠肝臟細(xì)胞的急性壞死性損傷,并且有顯著的劑量效應(yīng);家蠶脂肪體在劑量達(dá)3600 mg/kg時(shí)能夠觀察到急性壞死性損傷。血漿中典型急性肝衰竭酶活性指標(biāo)測(cè)定結(jié)果顯示,兩種動(dòng)物模型的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和堿性磷酸酶(ALP)活性,伴隨著肝臟/脂肪體細(xì)胞急性壞死性損傷而顯著升高。顯示高濃度的APAP暴露,能夠誘發(fā)小鼠的肝臟以及家蠶的脂肪體發(fā)生相似的急性壞死性損傷,表明家蠶脂肪體能夠替代小鼠的肝臟開(kāi)展APAP的組織損傷機(jī)制研究。2黑化是肝臟/脂肪體損傷的可靠指標(biāo)探究小鼠肝臟以及家蠶脂肪體發(fā)生損傷的同時(shí),是否有更為便捷的外觀檢測(cè)方法。結(jié)果顯示,小鼠經(jīng)口給藥600 mg/kg APAP時(shí)肝臟發(fā)生了黑化,給藥后0 h-4 h黑化程度不斷增加,隨后逐漸減弱,至給藥后32 h肝臟組織恢復(fù)至對(duì)照程度,呈典型的時(shí)間-劑量效應(yīng),觀察其體表顏色無(wú)明顯變化。家蠶經(jīng)口給藥APAP后,脂肪體顏色未見(jiàn)明顯改變但體表出現(xiàn)黑斑,且劑量越大,黑斑黑化程度越嚴(yán)重,黑化出現(xiàn)的時(shí)間越早,具有典型的時(shí)間-劑量效應(yīng)。小鼠經(jīng)口給藥APAP后1 h-32 h,對(duì)血漿以及肝臟黑色素含量進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果顯示處理組黑色素含量明顯高于對(duì)照組,呈時(shí)間-劑量效應(yīng);家蠶經(jīng)口給藥APAP后,高劑量處理組黑色素生成限速酶酚氧化酶(PO)的活性在給藥后0.5 h-4 h顯著高于對(duì)照組,隨后逐漸恢復(fù)。表明,伴隨著肝臟/脂肪體受損的同時(shí),小鼠的循環(huán)血液和肝臟中出現(xiàn)了黑色素積累與肝臟黑化,而家蠶在循環(huán)血液中出現(xiàn)黑色素合成代謝增強(qiáng)的同時(shí),體色黑化能夠顯示APAP暴露后脂肪體的同步損傷。3小鼠和家蠶黑色素形成代謝通路的比較經(jīng)口給藥APAP后1 h-8 h,HPLC方法測(cè)定血漿中黑色素代謝起始底物苯丙氨酸(Phe)以及酪氨酸(Tyr)的含量,得出無(wú)論在小鼠還是家蠶中暴露APAP組與對(duì)照組相比Phe含量均先下降,但在動(dòng)物適應(yīng)性恢復(fù)后,Phe含量出現(xiàn)升高,其中小鼠的恢復(fù)速度快于家蠶;Tyr的含量先升高后下降,其中家蠶開(kāi)始下降的時(shí)間和下降幅度顯著快/大于小鼠。結(jié)果表明APAP誘導(dǎo)了從Phe生成Tyr的代謝水平升高。對(duì)Tyr的下游代謝通路進(jìn)行調(diào)查,結(jié)果顯示小鼠經(jīng)口給藥APAP后4 h,血漿中腎上腺素(EPI)含量明顯高于對(duì)照組,表明APAP誘導(dǎo)的Tyr既用于形成黑色素也合成EPI。家蠶Tyr用于形成多巴,多巴進(jìn)一步代謝為多巴胺和多巴醌,APAP處理后的家蠶血漿中多巴含量減少,而多巴胺的含量顯著增加,表明在家蠶體內(nèi)APAP誘導(dǎo)多巴胺通路代謝活性也得到顯著提升,最終代謝生成黑色素;而小鼠體內(nèi)多巴胺支路形成了EPI,只有多巴醌支路最終合成了黑色素。因此,暗示使用家蠶動(dòng)物模型比小鼠具有更高靈敏性來(lái)評(píng)判APAP誘導(dǎo)的黑色素生成代謝影響。本文結(jié)論:高劑量APAP誘導(dǎo)的哺乳動(dòng)物肝臟急性衰竭損傷之前,循環(huán)血中黑色素生成代謝水平顯著升高并伴隨出現(xiàn)肝臟黑化。無(wú)脊椎模式動(dòng)物家蠶的體表黑化面積有望成為檢測(cè)APAP類藥物組織代謝毒性的敏感外觀指標(biāo)。
【關(guān)鍵詞】:對(duì)乙酰氨基酚 肝毒性 黑化 動(dòng)物模型
【學(xué)位授予單位】:蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:R965;R-332
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-11
- 第一章 序論11-32
- 1 文獻(xiàn)綜述11-29
- 1.1 急性肝衰竭11-17
- 1.2 急性肝衰竭動(dòng)物疾病模型17-23
- 1.3 黑色素與體色23-29
- 2 研究目的與研究?jī)?nèi)容29-30
- 2.1 研究目的和意義29-30
- 2.2 主要研究?jī)?nèi)容30
- 3 研究技術(shù)路線30-32
- 第二章 APAP誘發(fā)小鼠肝臟黑化機(jī)制及其無(wú)脊椎動(dòng)物快速檢測(cè)模型32-65
- 1 實(shí)驗(yàn)材料與方法32-47
- 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物32-33
- 1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理33-34
- 1.3 主要試劑及試劑盒34-35
- 1.4 主要儀器設(shè)備35-36
- 1.5 實(shí)驗(yàn)方法36-47
- 1.6 數(shù)據(jù)分析軟件47
- 2 結(jié)果與分析47-63
- 2.1 APAP原藥在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移47-49
- 2.2 APAP引起了家蠶脂肪體與小鼠肝臟相似的組織損傷49-51
- 2.3 黑化是肝臟/脂肪體損傷的指標(biāo)51-57
- 2.4 小鼠和家蠶黑色素形成代謝通路的比較57-61
- 2.5 家蠶血漿中GSH含量與黑色素形成的關(guān)系61-63
- 3 討論63-65
- 第三章 結(jié)論65-67
- 1 結(jié)論65
- 2 論文創(chuàng)新點(diǎn)65
- 3 后續(xù)研究展望與建議65-67
- 參考文獻(xiàn)67-78
- 發(fā)表論文與參與項(xiàng)目78-80
- 攻讀學(xué)位期間公開(kāi)發(fā)表論文78
- 攻讀學(xué)位期間國(guó)際會(huì)議發(fā)表論文78
- 攻讀學(xué)位期間投稿論文78-79
- 攻讀學(xué)位期間參與項(xiàng)目79-80
- 附錄80-85
- 附錄1 文中主要縮略詞表80-81
- 附錄2 小鼠(MUS)與家蠶(BM)血漿中游離氨基酸含量81-85
- 致謝85-87
【參考文獻(xiàn)】
中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前9條
1 Julian F. V. Vincent;Sally E. Clift;Carlo Menon;;Biomimetics of Campaniform Sensilla:Measuring Strain from the Deformation of Holes[J];Journal of Bionics Engineering;2007年02期
2 胡圣堯;聶志妍;袁勤生;;還原型谷胱甘肽的研究進(jìn)展[J];食品與藥品;2009年01期
3 姚慧鵬;郭愛(ài)芹;何芳青;魯興萌;吳小鋒;;家蠶幼蟲(chóng)5齡期中腸蛋白質(zhì)組學(xué)[J];生物工程學(xué)報(bào);2008年01期
4 周慶祥,張志芳;家蠶血球的生成機(jī)理[J];中國(guó)蠶業(yè);2004年02期
5 霍麗麗;紀(jì)立農(nóng);;血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶與糖代謝狀況關(guān)系的研究[J];中國(guó)糖尿病雜志;2012年02期
6 張金良;曾輝;王憲波;;急性肝衰竭模型中醫(yī)證型探討[J];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志;2011年05期
7 李溯;丁勁松;;黑色素生物合成與酪氨酸酶抑制劑的研究進(jìn)展[J];中南藥學(xué);2013年04期
8 王媛;劉巖;袁娟麗;杜欣;;藥物性肝損傷研究進(jìn)展[J];中國(guó)藥物經(jīng)濟(jì)學(xué);2013年05期
9 徐光堯;肝臟的生理功能[J];安醫(yī)學(xué)報(bào);1978年05期
本文關(guān)鍵詞:對(duì)乙酰氨基酚誘發(fā)小鼠肝臟黑化機(jī)制及其無(wú)脊椎動(dòng)物快速檢測(cè)模型,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):306845
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