目的:闡述單克隆抗體anti-SraP_L-Lectin在小鼠巨噬細(xì)胞吞噬殺傷金黃色葡萄球菌過(guò)程中的功能。方法:PCR擴(kuò)增sraP相應(yīng)基因片段,并克隆至pET28a表達(dá)載體,用0.1 mmol/L異丙基硫代半乳糖苷（isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG）誘導(dǎo)表達(dá),鎳柱純化重組蛋白,經(jīng)Western blot分析anti-SraP_L-Lectin的特異性,采用qPCR檢測(cè)巨噬細(xì)胞炎癥因子誘導(dǎo)表達(dá)水平,CCK8檢測(cè)金黃色葡萄球菌的增殖抑制率,涂板計(jì)數(shù)巨噬細(xì)胞上清和裂解液中金黃色葡萄球菌的菌落數(shù)。結(jié)果:anti-SraP_L-Lectin不僅能與不同截短類(lèi)型的SraP重組蛋白結(jié)合,而且能與金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁蛋白發(fā)生特異性結(jié)合;anti-SraP_L-Lectin能下調(diào)小鼠巨噬細(xì)胞促炎因子[腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白介素（interleukin,IL）-1β、IL-12p40]的表達(dá)并上調(diào)抑炎因子（IL-10）的表達(dá)。慶大霉素... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019,39(04)北大核心

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【部分圖文】：

AntiSraPLLectin單克隆抗體特異性的鑒定Figure1IdentificationofspecificityofantiSraPLLectinan：A：截短SraP重組蛋白與antiSraPLLectin的結(jié)合；M：Marker；1：SraP245492；2：SraP245572；3：SraP245751；4：SraP90751；B：金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁蛋白與antiSraPLLectin的結(jié)合

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]金黃色葡萄球菌富絲氨酸重復(fù)蛋白SraPL-Lectin特異性抗體的制備及其功能分析[J]. 岳巖,鄭峰,曹清心,王怡雯,周婷婷,王長(zhǎng)軍.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2018(11)



本文編號(hào)：3065851