背景造血干細(xì)胞具有自我更新和定向分化為多系成熟血細(xì)胞的能力，進(jìn)行干細(xì)胞擴(kuò)增一直是科學(xué)家們研究的熱點(diǎn)。大量的研究顯示，在不同細(xì)胞因子組合條件下所進(jìn)行的懸浮和貼壁擴(kuò)增培養(yǎng)體系并未獲得大量干細(xì)胞，而且存在擴(kuò)增時(shí)間短等等諸多問(wèn)題。眾所周知，許多細(xì)胞的關(guān)鍵功能，比如細(xì)胞分裂分化成為特定細(xì)胞、對(duì)刺激因子的應(yīng)答，甚至細(xì)胞死亡，都是通過(guò)細(xì)胞的信號(hào)和基因活化來(lái)完成的。多年來(lái)的研究證實(shí)“二聚化”是細(xì)胞內(nèi)外蛋白活化中信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的核心，是細(xì)胞分子生物學(xué)中的一般機(jī)理。當(dāng)兩個(gè)蛋白發(fā)生二聚化，信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)就被激活。根據(jù)這些分子生物學(xué)機(jī)制，開發(fā)了基因調(diào)控表達(dá)技術(shù)，通過(guò)利用小分子化合物來(lái)控制細(xì)胞的生長(zhǎng)，使細(xì)胞的特定信號(hào)激活或轉(zhuǎn)錄成為可能。最近研究已經(jīng)證實(shí)，JAKs-STATs信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路在干細(xì)胞的自我更新中扮演著重要的作用，而且大多數(shù)細(xì)胞因子又是通過(guò)JAKs-STATs來(lái)傳遞信號(hào)的。JAK2是JAK家族的重要成員，在干／祖細(xì)胞的自我更新中又起著重要的樞紐性作用。因此，我們構(gòu)建克隆了一個(gè)以MSCV-Based的逆轉(zhuǎn)錄病毒載體，內(nèi)含有JAK2的功能信號(hào)區(qū)域和兩個(gè)對(duì)二聚化化學(xué)誘導(dǎo)物（AP20187）有高度親和力的結(jié)合位點(diǎn)（F3... 

【文章來(lái)源】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖反應(yīng)曲線

天數(shù)圖1細(xì)胞增殖反應(yīng)曲線NoGF(growtllfactor)組、APZo187組、KL(sCF)組、細(xì)胞在l周至1月左右死亡;只有AP20187十KL組、AP2087+KL+FL組可以持續(xù)使造血細(xì)胞擴(kuò)增。FL組、KL+FLAP20187+FL組

圖6.ASF細(xì)胞表型Seal陽(yáng)性細(xì)胞為52一98%、ckit陽(yáng)性細(xì)胞為56~69%、CD3胞為4小85%、TER119陽(yáng)性為0一20%、CD41陽(yáng)性為5一36%約12~46%、Grl陽(yáng)性率卜17%、CD1lb為35碑6%和C性。


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