目的：探索人胚骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（bone marrow mesenchymal stem cell，MSC）的體外增殖條件和定向分化為多巴胺能神經(jīng)元的誘導(dǎo)條件；同時，以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體，嘗試把人bFGF基因轉(zhuǎn)入MSC，為進(jìn)一步利用MSC進(jìn)行帕金森疾病的細(xì)胞替代治療和基因治療提供理論基礎(chǔ)。 方法：采用MTT比色法檢測不同接種密度、不同濃度的胎牛血清、EGF和PDGF-BB對MSC生長的影響；應(yīng)用RA、bFGF、FGF-8和BDNF對不同代數(shù)的MSC進(jìn)行誘導(dǎo)，通過細(xì)胞免疫熒光和Western blot鑒定誘導(dǎo)后的細(xì)胞；構(gòu)建pLXSN-bFGF病毒質(zhì)粒，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染PA317包裝細(xì)胞，G418篩選，PCR鑒定抗性克隆中bFGF基因的整合情況，制備相應(yīng)的病毒，感染MSC。 結(jié)果：以接種密度為1×10⁴個／ml、加入10％胎牛血清、10ng／ml EGF和10ng／ml PDGF-BB的培養(yǎng)條件最有利于MSC的增殖；MSC經(jīng)RA誘導(dǎo)后定向分化為不具備多巴胺能神經(jīng)元表型的神經(jīng)元樣細(xì)胞，經(jīng)bFGF、FGF-8和BDNF誘導(dǎo)后，大部分細(xì)胞定向分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞而非神經(jīng)膠... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：79 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

比較不同濃度的PDGF-BB對MSC生長的影響

圖1.6流式細(xì)胞術(shù)分析不同濃度PDGF一BB作用下MSC的細(xì)胞周期A:Controle:sng/mlpnGr一BB作用下Mse的細(xì)胞周期rng/mlpDGF一BB作用下Mse的細(xì)胞周期long/mlPnGF一BB作用下MsC的細(xì)胞周期DB

圖1.6流式細(xì)胞術(shù)分析不同濃度PDGF一BB作用下MSC的細(xì)胞周期pnGr一BB作用下Mse的細(xì)胞周期rng/mlpDGF一BB作用下Mse的細(xì)long/mlPnGF一BB作用下MsC的DB

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]成纖維細(xì)胞生長因子研究進(jìn)展[J]. 金曼林,童坦君.  生理科學(xué)進(jìn)展. 1994(02)



本文編號：3059329