目的分析Walvax-2細(xì)胞基質(zhì)培養(yǎng)甲型肝炎病毒（hepatitis A virus,HAV）YN5株的遺傳穩(wěn)定性。方法將HAV YN5株在Walvax-2細(xì)胞中于35℃連續(xù)適應(yīng)培養(yǎng),取P24、P27、P29、P35和P40代病毒,提取RNA,以其為模板進(jìn)行RT-PCR擴(kuò)增,并測(cè)序。采用生物信息學(xué)軟件DNAMAN、Vector NTI、BioEdit等進(jìn)行序列分析,與GenBank中登錄的標(biāo)準(zhǔn)株HM175（M14707）進(jìn)行同源性比較。結(jié)果 5代病毒全基因組間的核苷酸序列同源性為100%。與標(biāo)準(zhǔn)株HM175比較,5代病毒基因組5′-NCR（101～200 bp）片段的124和152位發(fā)生突變,且存在134～137 bp缺失;2A（3 012～3 210 bp）片段的3 025和3 196位發(fā)生突變,其中,3 025位點(diǎn)A變?yōu)門,與標(biāo)準(zhǔn)株HM175 VP1/2A（3 024～3 191 bp）的差異小于7. 5%,基因亞型與其相同,均為IB型;2C（3 986～4 960 bp）片段的4 043、4 087、4 185、4 222、4 563、4 802、4 880位點(diǎn)發(fā)生突變。5代病毒... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2019,32(05)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 細(xì)胞及毒株
    1.2 主要試劑
    1.3 病毒的培養(yǎng)及傳代
    1.4 病毒基因擴(kuò)增
    1.5 病毒基因序列分析
2 結(jié)果
    2.1 各代次毒株基因組核苷酸序列的同源性
        2.1.1 全基因組
        2.1.2 5′-NCR （101～200 bp） 片段
        2.1.3 2A （3 012～3 210 bp） 片段
        2.1.4 2C （3 986～4 960 bp） 片段
    2.2 各代次毒株氨基酸序列同源性及變異情況
    2.3 各代毒株主要抗原位點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)株HM175的比較
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]基于時(shí)空大數(shù)據(jù)的甲型肝炎發(fā)病率分布特征分析及預(yù)測(cè)模型[J]. 朱佳佳,胡登利,洪秀琴,查文婷,呂媛.  中華疾病控制雜志. 2018(11)
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[6]甲型肝炎病毒Js-4株經(jīng)人二倍體細(xì)胞傳代后的核苷酸序列分析[J]. 胡艷靈,陳統(tǒng)球,黃明,戚鳳春,崔燕萍,潘翔.  中國(guó)生物制品學(xué)雜志. 2012(09)

博士論文
[1]人胚胎二倍體細(xì)胞株Walvax-2的建立、檢定及應(yīng)用[D]. 馬波.武漢大學(xué) 2015
[2]甲型肝炎病毒在人源二倍體細(xì)胞的分子進(jìn)化研究[D]. 唐彩華.浙江大學(xué) 2007

碩士論文
[1]兩株新建人胚肺二倍體細(xì)胞株的細(xì)胞生物學(xué)研究[D]. 高垚.昆明醫(yī)科大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3056905