[背景]保守、通用的遺傳密碼決定了所有有機體中所有蛋白質(zhì)的氨基酸序列。然而，這個密碼不足以提供能明確這些蛋白質(zhì)三維結(jié)構(gòu)和功能的相關(guān)信息。研究表明由互補的核酸序列編碼的有義肽和反義肽之間存在特殊的相互作用，由此就提出了有第二套二維的遺傳密碼即蛋白密碼的存在。M-I（Mekler-Idlis）配對理論，提出了有義肽中密碼子編碼的氨基酸殘基可與相應的互補肽中密碼子編碼的殘基發(fā)生特定的兩兩相互作用。AHBs（反義同源盒）理論和分子識別理論描述了蛋白分子內(nèi)和蛋白分子間可以特異結(jié)合的區(qū)域結(jié)構(gòu)具有正義與反義的關(guān)系。受體與配體的相互作用實質(zhì)上是蛋白質(zhì)分子間的識別、結(jié)合和相互作用的過程。將受體看作是有義肽，那么可與之特異結(jié)合的配體分子中可能存在一段或多段反義肽，而且其存在的部位是配體功能的關(guān)鍵位置。Fas（APO-1，CD95）屬于腫瘤壞死因子超家族之一員，是Fas配體（FasL）的受體。當它的配體FasL與之結(jié)合后，可以引起表達Fas的細胞發(fā)生凋亡。本研究依據(jù)AHBs理論，應用自行編寫的軟件，在FasL分子中尋找到與Fas相應的反義多肽最為接近的十肽結(jié)構(gòu)即FasL_256-265（... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

375細胞mRNA鑒定

MD一11a質(zhì)粒進行連接反應，轉(zhuǎn)化新鮮制備的K802感受態(tài)菌，涂布于含Amp的平板上，將轉(zhuǎn)化平板上生長出的轉(zhuǎn)化子進行鑒定。挑取分離良好的菌落先進行菌落PCR以初步篩選，見圖4一1。選初步篩選為陽性重組子的細菌抽提質(zhì)粒，以Ndel和BamHI雙酶切鑒定，獲得含有FasL基因的重組質(zhì)粒，命名為pMD一1ST一FasL一ECD，酶切鑒定的電泳結(jié)果如圖4一2所示。50ObPFasL一ECD引物二聚體12345圖4一1重組K802一pMD一FasL菌的PCR鑒定l泳道為DNAMarker:LambdaDNA/EeoRI+Hind1112一5泳道為KsoZ一pMD一FasL菌的peR產(chǎn)物PMD一1ST500bPFaSL一ECD12345圖4一2重組KsoZ一pMD一FasL菌的酶切鑒定l泳道為nNAMarker:LambdanNA/EcoRI+HindIxx2一5泳道為分別為圖3一1中所對應的重組質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物，其中2泳道為空質(zhì)粒

MD一11a質(zhì)粒進行連接反應，轉(zhuǎn)化新鮮制備的K802感受態(tài)菌，涂布于含Amp的平板上，將轉(zhuǎn)化平板上生長出的轉(zhuǎn)化子進行鑒定。挑取分離良好的菌落先進行菌落PCR以初步篩選，見圖4一1。選初步篩選為陽性重組子的細菌抽提質(zhì)粒，以Ndel和BamHI雙酶切鑒定，獲得含有FasL基因的重組質(zhì)粒，命名為pMD一1ST一FasL一ECD，酶切鑒定的電泳結(jié)果如圖4一2所示。50ObPFasL一ECD引物二聚體12345圖4一1重組K802一pMD一FasL菌的PCR鑒定l泳道為DNAMarker:LambdaDNA/EeoRI+Hind1112一5泳道為KsoZ一pMD一FasL菌的peR產(chǎn)物PMD一1ST500bPFaSL一ECD12345圖4一2重組KsoZ一pMD一FasL菌的酶切鑒定l泳道為nNAMarker:LambdanNA/EcoRI+HindIxx2一5泳道為分別為圖3一1中所對應的重組質(zhì)粒的酶切產(chǎn)物，其中2泳道為空質(zhì)粒

【參考文獻】：
期刊論文
[1]膜蛋白Fas及其配體FasL系統(tǒng)與病毒感染[J]. 馬本江,杭長壽.  中華實驗和臨床病毒學雜志. 2001(01)
[2]Fas系統(tǒng)研究進展[J]. 朱錫華.  中華微生物學和免疫學雜志. 1996(02)



本文編號：3053851