目的制備Cre-LoxP重組酶系統(tǒng)調(diào)控下的T淋巴細(xì)胞Perp基因條件性敲除的純合子小鼠并進(jìn)行鑒定,為進(jìn)一步在整體動物水平研究Perp基因在T細(xì)胞發(fā)育以及在自身免疫疾病發(fā)病中的作用提供研究平臺。方法將引進(jìn)的Perp條件敲除小鼠和T淋巴細(xì)胞特異性表達(dá)Cre重組酶的Lck-Cre小鼠分別進(jìn)行繁殖和鑒定,然后將兩種小鼠進(jìn)行雜交并對其子代小鼠的基因型進(jìn)行鑒定,其子代基因型為Lck-Cre×Perpflox/flox的小鼠即為本實(shí)驗(yàn)所構(gòu)建的T細(xì)胞Perp基因特異性敲除的純合子小鼠。結(jié)果 Lck-Cre×Perpflox/flox的純合子小鼠被繁殖成功并準(zhǔn)確鑒定。Lck-Cre×Perpflox/flox小鼠脾臟CD3+細(xì)胞的Perp基因的RNA及蛋白表達(dá)水平與Lck-Cre×Perp+/+小鼠相比顯著降低。結(jié)論本研究利用Cre-LoxP技術(shù)成功構(gòu)建了T細(xì)胞特異性敲除Perp基因的純合子小鼠,為進(jìn)一步研究Perp基因在T淋巴細(xì)胞發(fā)育以及自身免疫性疾病發(fā)病中的作用提供了優(yōu)良的工具。 

【文章來源】：成都醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2014,9(02)

【文章頁數(shù)】：4 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
        1.1.1實(shí)驗(yàn)動物
        1.1.2主要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 Perp條件基因敲除小鼠的建立
        1.2.2聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）及水平電泳
        1.2.3 qPCR以及Western Blot檢測Perp表達(dá)水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
2 結(jié)果
    2.1 Perpflox小鼠的繁殖、生長及鑒定
    2.2 表達(dá)Cre重組酶小鼠的繁殖、生長及鑒定
    2.3 Lck-Cre×Perpflox/flox小鼠脾臟T細(xì)胞中Perp的表達(dá)水平
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Conditional gene manipulation:Cre-ating a new biological era[J]. Jian ZHANG,Jing ZHAO,Wen-jie JIANG,Xi-wei SHAN,Xiao-mei YANG,Jian-gang GAO(School of Life Science,Shandong University,Jinan 250100,China).  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2012(07)
[2]條件基因打靶研究存在的主要問題及對策[J]. 林福玉,楊曉.  遺傳. 2011(05)



本文編號：3045346