利用穩(wěn)定的稀土標記物BHHCT-Eu3+、BPTA-Tb3+和銪納米顆粒建立夾心型固相時間分辨熒光免疫分析（TrFIA）直接定量測定乙肝表面抗原（HBsAg）的新方法。結果表明，使用BHHCT-Eu3+-HBsAb、BHHCT-Eu3+-SA-BSA、BPTA-Tb3+-SA和銪納米顆粒-HBsAb四種標記物的最低檢出限分別為0． 2 ng／mL、0． 05 ng／mL、0． 06 ng／mL和0． 03 ng／mL，標準曲線范圍為0-100 ng／mL（BPTA-Tb3+-SA的為0-50 ng／mL）。采用相同的抗原和抗體，ELISA的最低檢出限為0． 5 ng／mL，標準曲線范圍為0-10 ng／mL，說明稀土標記物TrFIA具有明顯提高的定量檢測能力。四種標記物檢測標準樣品或血清樣品的批內變異系數(shù)CV均小于10％，后三種檢測陽性血清的回收率為85％-110％。使用銪納米顆粒標記物的TrFIA和ELISA兩種方法同時定量檢測31份HBsAg陽性血清，兩者的相關系數(shù)達0． 98。另外，以磁性微球作為免疫反應的固相，銪納米顆粒作為標記物，建立起固相磁分離TrFIA定量測定HBsAg的... 

【文章來源】：廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：62 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
英文摘要
一 前言
    （一） 稀土絡合物的特點
    （二） 時間分辨熒光分析法的原理
    （三） 時間分辨熒光分析法的應用
    （四） 稀土絡合劑的分類及主要TrFIA系統(tǒng)
二 材料與方法
    （一） 材料
        1 主要材料與試劑
        2 溶液配置
        3 主要儀器
    （二） 方法
        1 銪和鋱絡合物用于HBsAg的時間分辨熒光免疫檢測
            1. 1 BHHCT-Eu3+-HBsAb的制備
            1. 2 BHHCT-Eu3+-SA-BSA的制備
            1. 3 羊抗人HBsAb的生物素化
            1. 4 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA 測定HBsAg
            1. 5 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA測定HBsAg
            1. 6 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA測定HBsAg
        2 銪納米顆粒超高靈敏時間分辨熒光免疫檢測HBsAg
            2. 1 銪納米顆粒-HBsAb復合物的制備
            2. 2 銪納米顆粒-HBsAb-TrFIA測定HBsAg
        3 磁分離時間分辨熒光免疫檢測HBsAg的新方法
            3. 1 磁性微球．HBsAb復合物的制備
            3. 2 磁分離時間分辨熒光免疫檢測HBsAg的新方法
三 結果與討論
    1 銪和鋱絡合物用于HBsAg的時間分辨熒光免疫檢
        1. 1 BHHCT和BPTA的性質
        1. 2 BHHCT-Eu3+-HBsAb-TrFIA測定HBsAg
        1. 3 BHHCT-Eu3+-SA-BSA-TrFIA測定HBsAg
        1. 4 BPTA-Tb3+-SA-TrFIA測定HBsAg
        結論
    2 銪納米顆粒超高靈敏時間分辨熒光免疫檢測HBsAg
        2. 1 銪納米顆粒的性質
        2. 2 銪納米顆粒-HBsAb-TrFIA測定HBsAg
        結論
    3 磁分離時間分辨熒光免疫檢測HBsAg的新方法
        3. 1 磁性微球的性質
        3. 2 磁分離時間分辨熒光免疫檢測HBsAg的新方法
        結論
四 展望
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]六種國產乙肝表面抗原ELISA診斷試劑盒的對比評價[J]. 徐品.  中國衛(wèi)生檢驗雜志. 2000(03)
[2]斑點金免疫滲濾法快速檢測乙肝表面抗原[J]. 紀愛芳,郭進軍,郭止不.  長治醫(yī)學院學報. 2000(01)
[3]摻雜TiO2光催化膜材料的制備及其滅菌機理[J]. 劉平,林華香,付賢智,孟春.  催化學報. 1999(03)
[4]熱敏相分離熒光免疫分析乙肝表面抗原的新方法[J]. 朱慶枝,楊黃浩,李東輝,許金鉤,張毅,張長弓.  高等學�；瘜W學報. 1999(04)
[5]免疫磁性制劑的研究[J]. 徐敏,姜麗麗.  藥學進展. 1999(01)
[6]熒光共振能量轉移技術在生物分析中的應用[J]. 魏亦男,李元宗,常文保,慈云祥.  分析化學. 1998(04)
[7]膠體金免疫層析法檢測乙型肝炎病毒表面抗原[J]. 周繼文,戎廣亞,楊守純,張建宗,程云,任繼明.  中華醫(yī)學檢驗雜志. 1998(01)
[8]乙肝表面抗原固相放免定量藥盒的特性[J]. 徐哲,孔繁信.  同位素. 1997(03)
[9]時間分辨熒光分析法在DNA探針檢測中的初步應用[J]. 游冬青,陳杞,張麗民,賀廣彩,鄒魯峰,陳克明.  生物化學雜志. 1997(02)
[10]時間分辨熒光核酸雜交分析體系的建立及其初步應用[J]. 游冬青,陳杞,張麗民,賀廣彩,韓玲,鄒魯峰,陳克明.  第二軍醫(yī)大學學報. 1996(04)



本文編號：3043436