發(fā)布時(shí)間：2021-02-10 11:23

　　目的明確衰老相關(guān)microRNA與恒河猴增齡的相關(guān)性。方法將猴群參照人類(lèi)增齡劃分為幼年、成年、老年和長(zhǎng)壽,提取外周血白細(xì)胞的總RNA;用real-time PCR檢測(cè)外周血白細(xì)胞中的microRNA及VEGFA、GHR、TBP、INSR、CLOCK、IKBKB、PIK3R1、LRP2、SSTR3、IGF1R、BCL2、PPM1D、IRS1、MAPK8、ADCY5、APP、NFE2L1、BDNF和PEX5的表達(dá);利用microRNA靶基因預(yù)測(cè)網(wǎng)站miRwalk、TargetSan、miRecords、miRDB預(yù)測(cè)miR-16-5p的靶基因,并與人類(lèi)衰老基因庫(kù)（http://genomics.senescence.info/）對(duì)接。結(jié)果在增齡過(guò)程中,恒河猴外周血白細(xì)胞中miR-16-5p的表達(dá)量隨年齡增長(zhǎng)而增加（P<0.001）;多個(gè)網(wǎng)站對(duì)miR-16-5p靶基因預(yù)測(cè)得到539個(gè)潛在的靶基因,與人類(lèi)衰老基因組庫(kù)對(duì)接后有19個(gè)基因重合;有10個(gè)基因的mRNA在恒河猴增齡過(guò)程中存在差異表達(dá),其中, IKBKB、PIK3R1、IRS1的表達(dá)隨著年齡的增加逐漸下降。結(jié)論在自然衰老恒河猴的外... 

【文章來(lái)源】：基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2019,39(07)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

mircoＲNA在增齡恒河猴血液白細(xì)胞中的表達(dá)量變化A.real-timePCＲanalysisofmicroＲNAinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=6);B.real-timePCＲanalysisofmiＲ-16-5pinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=19);*P＜0.001comparedwithinfantgroup

ＲanalysisofmicroＲNAinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=6);B.real-timePCＲanalysisofmiＲ-16-5pinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood(n=19);*P＜0.001comparedwithinfantgroup圖1mircoＲNA在增齡恒河猴血液白細(xì)胞中的表達(dá)量變化Fig1ExpressionofmicroＲNAinleukocytesofagingrhesusmonkeys(x±s，n=6)A.WaynediagramofmiＲ-16-5ptargetgenepredictedbymiＲwalk，TargetSan，miＲecordsandmiＲDB;B.Waynedia-gramofmiＲ-16targetgeneandHumanAgeingGenomicＲesources圖2增齡恒河猴血液白細(xì)胞中miＲ-16-5p靶基因的預(yù)測(cè)Fig2PredictionofmiＲ-16-5ptargetgenesinleukocytesofagingrhesusmonkeys2.3自然增齡恒河猴外周血白細(xì)胞中miＲ-16-5p潛在的靶基因的表達(dá)變化情況檢測(cè)了預(yù)測(cè)得到的19條mＲNA在增齡恒河猴外周血白細(xì)胞中的表達(dá)，其中在樣本中檢測(cè)到了10條mＲNA(其余未檢測(cè)到)(圖3):IGF1Ｒ和PEX5的表達(dá)均在幼年組、成年組和老年組中逐漸升高，在長(zhǎng)壽組中降低，且相對(duì)于幼年組來(lái)說(shuō)其表達(dá)量?jī)H在老年組呈顯著差異(IGF1ＲP＜0.01;PEX5P＜0.05)。而TBP(P＜0.01)，PIK3Ｒ1(P＜0.05)僅在長(zhǎng)壽組中顯著降低，其余幾乎沒(méi)有變化;IKBKB的表達(dá)相對(duì)于幼年組來(lái)說(shuō)在成年組(P＜0.05)，老年組(P＜0.05)和長(zhǎng)壽組(P＜0.01)中均顯著下降;IＲS1的表達(dá)則在老年組(P＜0.05)，長(zhǎng)壽組(P＜0.05)中顯著降低。CLOCK、BCL、APP和NFE2L1的表達(dá)量的差異在各組間則無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3討論衰老是生物體隨年齡增長(zhǎng)面臨的機(jī)體各個(gè)功能的漸進(jìn)性喪失，而非人靈長(zhǎng)類(lèi)在進(jìn)化上最接近于人類(lèi)，所以將恒河猴用作實(shí)驗(yàn)?

ma-2596PPM1Dproteinphosphatase，Mg2+/Mn2+dependent1D8493IＲS1insulinreceptorsubstrate13667MAPK8mitogen-activatedproteinkinase85599ADCY5adenylatecyclase5111APPamyloidbetaprecursorprotein351NFE2L1nuclearfactorerythroid2-relatedfactor14779BDNFbrainderivedneurotrophicfactor627PEX5peroxisomalbiogenesisfactor55830Ｒeal-timePCＲanalysisofmiＲ-16targetgeneinleucocytesofagingrhesusmonkeysblood;*P＜0.05，＊＊P＜0.01，＊＊＊P＜0.001comparedwithinfantgroup圖3增齡恒河猴外周血白細(xì)胞中miＲ-16-5p靶基因的驗(yàn)證Fig3DetectionofmiＲ-16-5ptargetgenesinleukocytesofagingrhesusmonkeys(x±s，n=6)計(jì)學(xué)意義，可能是由于APP還受其他因素調(diào)節(jié)。根據(jù)對(duì)19條mＲNA的驗(yàn)證結(jié)果發(fā)現(xiàn)PIK3Ｒ1、IＲS1和IKBKB很可能是miＲ-16-5p在外周血白細(xì)胞中的靶基因，分別與胰島素信號(hào)通路及NFκB信號(hào)傳導(dǎo)相關(guān)。胰島素通路是調(diào)節(jié)糖代謝的重要通路，可以通過(guò)其受體IＲ及其受體底物IＲS激活PI-3K/AKT信號(hào)通路來(lái)發(fā)揮功能。IＲS1的缺失可以延長(zhǎng)小鼠的壽命［9］，其在腦部的異位磷酸化也與APP的異常聚集有關(guān)［10］。說(shuō)明胰島素通路與衰老有關(guān)，具體則可能是通過(guò)PI-3K/AKT通路及叉頭轉(zhuǎn)錄因子(FoxO)完成的。FoxO能被AKT磷酸化后離開(kāi)細(xì)胞核進(jìn)入到泛素降解途徑。而FoxO在核內(nèi)可以與轉(zhuǎn)錄因子共同激活其基因的表達(dá)，通過(guò)保護(hù)機(jī)體免受氧化應(yīng)激侵?jǐn)_［11］，增加受損蛋白的移除［12］999


本文編號(hào)：3027278