次級淋巴組織趨化因子（Secondary Lymphoid-Tissue Chemokine ,SLC）,即CCL21,是趨化因子（Chemokine）超家族成員。SLC通過其受體CCR7誘導(dǎo)T淋巴細胞和DC（dendritic cell）進入次級淋巴組織,并由DC提呈抗原,激活T淋巴細胞。因此SLC是引發(fā)特異性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵趨化因子之一。研究表明,缺乏鼠SLC的小鼠其T細胞歸巢和DC定位障礙,T細胞活化延遲,次級淋巴組織結(jié)構(gòu)紊亂。而SLC的過表達則密切參與了多種自身免疫性疾病的發(fā)生和發(fā)展。因此,SLC及其受體有望成為治療移植排斥反應(yīng)、自身免疫性疾病和腫瘤藥物設(shè)計的新靶點。為此我們克隆了人SLC成熟蛋白基因,構(gòu)建了該基因的原核表達質(zhì)粒,進行了重組蛋白的誘導(dǎo)表達、純化及生物學(xué)活性的鑒定,旨在為進一步研究SLC在移植排斥反應(yīng)、腫瘤發(fā)展與轉(zhuǎn)移和自身免疫性疾病中的作用機制及應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。該項研究取得的主要結(jié)果如下:1.通過從人扁桃體中提取總RNA,RT-PCR成功獲得編碼人SLC成熟蛋白的DNA片段（SLC起始密碼子下游第70-405base）,并將該片段插入原核表達質(zhì)粒pET32a（+）,成... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒pET32a(+)/SLC(＋3)的測序結(jié)果(S-Tag引物)

重組質(zhì)粒pET32a(+)/SLC(＋3)的測序結(jié)果(T7引物)

所獲 cDNA 序列如下：5’－……..ACCGACGACGACGACAAG -腸激酶位點(Enterkinase site)→SLC 天然蛋白序列AGTGATGGAGGGGCTCAGGACTGTTGCCTCAAGTACAGCCAAAGGAAGATTCCCGCCAAGGTTGTCCGCAGCTACCGGAAGCAGGAACCAAGCTTAGGCTGCTCCATCCCAGCTATCCTGTTCTTGCCCCGCAAGCGCTCTCAGGCAGAGCTATGTGCAGACCCAAAGGAGCTCTGGGTGCAGCAGCTGATGCAGCATCTGGACAAGACACCATCCCCACAGAAACCAGCCCAGGGCTGCAGGAAGGACAGGGGGGCCTCCAAGACTGGCAAGAAAGGAAAGGGCTCCAAAGGCTGCAAGAGGACTGAGCGGTCACAGACCCCTAAAGGGCCATAG－3’經(jīng)查對，與 GenBank 上登錄的編碼相應(yīng) SLC 天然蛋白的 cDNA 序列完全一致。該序列 GenBank 登錄號為 AB002409。測序結(jié)果如圖 3。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Expression of Helicobacter pylori Hsp60 protein and its immunogenicity[J]. Yang Bai Liang-Ren Li Ji-De Wang Ye Chen Dian-Yuan Zhou Ya-Li Zhang PLA Institute for Digestive Medicine,Nanfang Hospital,First Military Medical University,Guangzhou 510515,Guangdong Province,China Jian-Feng Jin Chemistry University of Beijing,Beijing 100071,China Zhao-Shan Zhang Institute of Biotechnology,Academy of Military Medical Science,Beijing 100071,China.  World Journal of Gastroenterology. 2003(12)
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[3]熱休克蛋白90α（HSP90α）在大腸桿菌中的表達[J]. 喬繪紅,趙玫,施一江,袁興華,范云霞,周純,徐楓,黃常志.  中國免疫學(xué)雜志. 2000(03)



本文編號：3019688