本文關(guān)鍵詞：利用ADAMTS-18基因敲除小鼠研究ADAMTS-18在骨骼發(fā)育中的作用及機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：含I型血小板結(jié)合蛋白模體的解整合素樣金屬蛋白酶ADAMTSs (a disintegrin andmetalloproteinase with thrombospondin motifs)是一類游離在血漿中的或者整合在細胞外基質(zhì)的金屬蛋白酶亞家族,共有19個成員,廣泛表達于人體的多種組織和器官,參與多種病理與生理過程。ADAMTS-18是一種“孤兒ADAMTSs (orphan ADAMTSs) ",即不知功能或底物的ADAMTS家族成員。有報道顯示ADAMTS-18與腫瘤發(fā)生、眼睛發(fā)育,及凝血酶切割相關(guān)。最近,生物信息學研究提示ADAMTS-18為一種新的骨密度發(fā)育相關(guān)基因,與人類的股骨骨折密切相關(guān)。我們前期研究發(fā)現(xiàn),ADAMTS-18參與了血栓溶解過程。為了進一步闡明ADAMTS-18在體內(nèi)的生物學作用,課題組在國際上率先建立了ADAMTS-18基因敲除(ADAMTS-18-/-)小鼠。在繁育ADAMTS-18基因敲除小鼠的過程中我們發(fā)現(xiàn)ADAMTS-18基因完全敲除小鼠有顯著的體格減小,提示ADAMTS-18基因缺失后會影響骨骼重塑。本研究首次利用ADAMTS-18基因敲除小鼠來探討ADAMTS-18對小鼠骨骼發(fā)育的影響及可能的分子機制。目的：本研究中,我們將利用ADAMTS-18基因敲除小鼠,研究ADAMTS-18與骨骼發(fā)育及骨質(zhì)疏松的關(guān)系；同時結(jié)合蛋白質(zhì)組學分析,探討ADAMTS-18影響骨骼重塑的可能的分子機制,從而為臨床骨質(zhì)疏松等骨相關(guān)疾病的治療提供新的靶點。方法：1、將ADAMTS-18+/-基因型雜合子的小鼠(以下簡稱HT)雄雌交配繁殖,利用PCR鑒定基因型,得到足夠數(shù)量的同一出生時期的ADAMTS-18+/+野生型小鼠(以下簡稱WT),ADAMTS-18-/-基因敲除小鼠(以下簡稱KO),全部為雄鼠。2、監(jiān)測ADAMTS-18基因敲除小鼠與野生鼠從胚胎時期一直到15 W的體重及身長,15 W后將小鼠麻醉處死取椎骨、股骨、脛骨、橈骨、肱骨,分別測出長度、重量以及生物力學檢測；3、通過生物信息學、HE(蘇木素伊紅)染色、Micro CT (微計算機斷層掃描技術(shù))及電鏡等方法,探討ADAMTS-18調(diào)控骨骼發(fā)育的機制。結(jié)果：1、KO小鼠與WT小鼠體重身長有顯著差異,基因敲除小鼠身長偏短,體重偏輕。2、KO小鼠與WT小鼠全身骨密度有顯著性差異,KO小鼠骨密度減少。3、KO小鼠與WT小鼠的股骨、脛骨、肱骨、橈骨長度重量以及生物力學均有差異,其中股骨各項指標均有顯著性差異。4、KO小鼠與WT小鼠的股骨Micro CT、電鏡以及HE染色提示ADAMTS-18缺失引起骨質(zhì)疏松及骨彈力纖維的發(fā)育異常。結(jié)論：1、ADAMTS-18基因敲除小鼠與野生鼠比較有明顯的骨骼發(fā)育異常；2、ADAMTS-18調(diào)控了骨骼重塑及骨彈力纖維發(fā)育。
【關(guān)鍵詞】：ADAMTS-18 基因敲除 骨骼 骨質(zhì)疏松 蛋白組學
【學位授予單位】：華東師范大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R3416
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 縮略詞10-15
• 第一章 前言15-20
• 1.1 ADAMTS-18的研究現(xiàn)狀15-16
• 1.2 骨質(zhì)疏松16-18
• 1.2.1 骨質(zhì)疏松的現(xiàn)狀16-17
• 1.2.2 骨質(zhì)疏松的發(fā)病機理17
• 1.2.3 骨質(zhì)疏松的臨床表現(xiàn)及診斷指標17-18
• 1.2.4 骨質(zhì)疏松的預防與治療18
• 1.3 本實驗的研究內(nèi)容及意義18-20
• 1.3.1 研究內(nèi)容18-19
• 1.3.2 研究意義19-20
• 第二章 實驗材料20-25
• 2.1 實驗動物20
• 2.2 主要實驗試劑20-21
• 2.3 主要實驗耗材21-22
• 2.4 主要實驗儀器22-23
• 2.5 PCR基因型鑒定的擴增引物23-24
• 2.6 常用試劑配方24-25
• 第三章 實驗方法25-33
• 3.1 ADAMTS-18基因敲除鼠及野生鼠的繁育及篩選鑒定25-28
• 3.1.1 繁育小鼠25
• 3.1.2 小鼠基因型鑒定及篩選25-27
• 3.1.3 實驗小鼠的選取27-28
• 3.2 小鼠體重身長的監(jiān)測28
• 3.3 小鼠活體骨密度(BMD)的測定28
• 3.4 小鼠四肢骨骼及椎骨的重量長度及生物力學測定28-29
• 3.5 骨髓細胞全蛋白的檢測---考馬斯亮藍染色29-30
• 3.6 股骨HE染色30-31
• 3.7 小鼠脛骨、股骨Micro CT掃描31-32
• 3.8 小鼠股骨電鏡掃描32
• 3.9 統(tǒng)計學分析32-33
• 第四章 實驗結(jié)果33-49
• 4.1 小鼠的繁育及PCR基因型鑒定33-34
• 4.2 小鼠身長體重的監(jiān)測34-36
• 4.3 小鼠活體骨密度(BMD)的測定及比較36-39
• 4.4 各部位骨骼的長度及重量的測定結(jié)果39-41
• 4.5 各部分骨骼生物力學測定41-43
• 4.6 股骨的HE染色結(jié)果43-44
• 4.7 Micro CT掃描結(jié)果44-46
• 4.8 股骨電鏡掃描結(jié)果46
• 4.9 課題組前期生物信息學分析46-48
• 4.10 骨髓細胞全蛋白的考馬斯亮藍染色結(jié)果48-49
• 第五章 討論49-53
• 參考文獻53-61
• 附錄61-64
• 致謝64-65

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 徐萌;李莉;柴夢音;陳德喜;;基因敲除小鼠肝病模型的研究進展[J];實驗動物科學;2013年06期

2 張元;郭慶喜;劉勇;唐紅;蒲霞;阮思蓓;羅霞;唐明希;;Presenilin-1/Presenilin-2雙基因敲除小鼠的繁育及基因型鑒定[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年11期

3 張文高,鄭廣娟;脂欣康膠囊抗載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化形成作用[J];生物醫(yī)學工程研究;2003年03期

4 張學新;孟艷;張文杰;趙春燕;趙雪儉;楊寶學;;尿素通道蛋白B基因敲除小鼠心臟電生理特性的改變[J];中國應用生理學雜志;2008年04期

5 葉添文;鄭晉華;安靜;郭清河;陳方經(jīng);陳愛民;;瞬時性受體電位通道香草酸受體亞型6基因敲除小鼠模型的建立[J];第二軍醫(yī)大學學報;2012年01期

6 凌文華,馬靜,李惠玲;氧化修飾和乙酰修飾低密度脂蛋白在A型清道夫受體基因敲除小鼠的清除[J];中國病理生理雜志;1999年04期

7 李滄海,霍海如,姜廷良;利用基因敲除小鼠研究發(fā)熱機制的進展[J];中國病理生理雜志;2002年09期

8 周淑佩,田楓,張闊,康愛君;脂蛋白酯酶基因敲除小鼠的繁育[J];實驗動物科學與管理;2005年02期

9 肖奎;王桂芳;董春玲;陳智鴻;胡成平;白春學;;水通道蛋白1基因敲除小鼠的飼養(yǎng)繁殖與基因型鑒定[J];湘南學院學報(醫(yī)學版);2007年01期

10 陳通克;陳錫文;管敏強;趙慧玲;王麗花;林孝坤;李安樂;;PAX-8基因敲除小鼠的飼養(yǎng)繁殖及基因型鑒定[J];實驗動物科學;2009年02期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張文高;鄭廣娟;張靜;王顯剛;劉龍濤;吳敏;張亞同;馬學盛;孟憲忠;;脂欣康膠囊對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化及斑塊穩(wěn)定性干預作用研究[A];第七次全國中西醫(yī)結(jié)合心血管病學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

2 張文高;鄭廣娟;王顯剛;劉龍濤;吳敏;張亞同;馬學盛;;載脂蛋白E基因敲除小鼠及其在心血管病中西醫(yī)結(jié)合研究中的應用[A];全國中西醫(yī)結(jié)合治療心血管病及血瘀證高級論壇和研修班論文匯編[C];2004年

3 張文高;鄭廣娟;孟憲忠;朱慶軍;張丹;王顯剛;楊勇;劉龍濤;吳敏;張亞同;馬學盛;;脂欣康等三種調(diào)脂中藥對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化及斑塊穩(wěn)定性干預作用研究[A];第四次全國中西醫(yī)結(jié)合養(yǎng)生學與康復醫(yī)學學術(shù)研討會論文集[C];2004年

4 張文高;楊秀麗;;載脂蛋白E基因敲除小鼠在老年神經(jīng)功能障礙疾病中西醫(yī)結(jié)合研究中的應用[A];第六次全國中西醫(yī)結(jié)合養(yǎng)生學與康復醫(yī)學學術(shù)研討會論文集[C];2009年

5 張文高;鄭廣娟;朱慶軍;張丹;張靜;王顯剛;楊勇;劉龍濤;吳敏;張亞同;馬學盛;孟憲忠;;脈心康與血脂康對載脂蛋白E基因敲除小鼠動脈粥樣硬化及易損斑塊干預作用與機理研究[A];第七次全國中西醫(yī)結(jié)合心血管病學術(shù)會議論文匯編[C];2005年

6 張文高;鄭廣娟;朱慶均;宋潔;楊秀麗;張丹;張靜;劉龍濤;王顯剛;;載脂蛋白E基因敲除小鼠及其在老年病中西醫(yī)結(jié)合研究中的應用[A];第八次全國中西醫(yī)結(jié)合虛證與老年醫(yī)學學術(shù)研討會論文集[C];2005年

7 張文高;;載脂蛋白E基因敲除小鼠在心血管病與老年病中西醫(yī)結(jié)合研究中的應用[A];中國醫(yī)師協(xié)會中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)師分會成立大會暨第一屆年會會議資料[C];2007年

8 劉樹強;羅昊澍;劉佳利;崔勝;;Sp1可通過與GC框結(jié)合直接調(diào)控Lhx4基因的表達[A];全國動物生理生化第十次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2008年

9 左寶芬;杜小燕;陳振文;;近交系基因敲除小鼠微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析[A];第十屆中國實驗動物科學年會論文集[C];2012年

10 劉學;李霄鶴;鄭小紅;寧文;;Fstl1基因敲除小鼠的表型分析[A];細胞—生命的基礎(chǔ)——中國細胞生物學學會2013年全國學術(shù)大會·武漢論文摘要集[C];2013年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 夏洪平;利用RNAi對肥胖和糖尿病進行治療[N];健康報;2005年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 喬梁;Nrf2基因敲除小鼠創(chuàng)傷性腦損傷后認知功能研究[D];南京大學;2011年

2 趙天倚;應用基因敲除小鼠模型研究PZR的生物學功能[D];吉林大學;2016年

3 張學新;尿素通道蛋白B基因敲除小鼠心臟電生理特性的改變及其機制研究[D];吉林大學;2007年

4 只向成;CD36基因敲除小鼠的皮膚傷口愈合[D];天津醫(yī)科大學;2003年

5 孟博;REGγ基因敲除小鼠類精神分裂癥行為學及分子機制初探[D];華東師范大學;2010年

6 徐康;OPG基因敲除小鼠骨、糖和脂的代謝變化[D];中南大學;2008年

7 趙立玲;脂聯(lián)素基因敲除小鼠血管鈣化及其鈣化機制的研究[D];中南大學;2009年

8 崔勇志;小鼠Stat3/5基因座的克隆及Stat5a/b條件性基因敲除小鼠的制備[D];中國醫(yī)科大學;2002年

9 杜艷偉;代謝重構(gòu)在UT-B基因敲除小鼠心肌肥大發(fā)病機制中的作用[D];吉林大學;2015年

10 孫東云;化瘀滌痰通路中藥調(diào)控腎上腺髓質(zhì)素抑制腎小管上皮細胞表型轉(zhuǎn)化的研究[D];河北醫(yī)科大學;2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 唐賀;利用FGF13心肌條件性基因敲除小鼠研究FGF13在心律失常中的作用及其機制[D];河北醫(yī)科大學;2015年

2 張曼;FKBP51在抵制高脂誘導肥胖中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2015年

3 李甲璐;zkscan3基因敲除小鼠模型的建立與其功能研究[D];蘇州大學;2015年

4 李睿;脂聯(lián)素及其受體對血管內(nèi)皮細胞一氧化氮合酶活性差異調(diào)節(jié)的分子機制研究[D];山西醫(yī)科大學;2015年

5 覃思源;外源性一氧化碳釋放分子CORM-2通過Nrf2通路抑制LPS誘導的急性炎癥反應[D];南京大學;2014年

6 楊俊;端粒酶RNA基因Terc在非酒精性脂肪性肝病中的作用機制研究[D];浙江大學;2015年

7 畢俊杰;GPS2基因敲除小鼠模型建立及表型分析[D];天津大學;2014年

8 王琦;UT-B基因敲除小鼠腦中精氨酸酶Ⅰ的表達變化及炎癥反應的發(fā)生[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

9 陳振中;Cdc42前腦特異性基因敲除小鼠基礎(chǔ)行為學及可卡因成癮行為學的研究[D];南方醫(yī)科大學;2013年

10 馬勇政;NDRG2調(diào)控結(jié)直腸癌細胞增殖的機制研究及其腸道特異性Ndrg2基因敲除小鼠的建立[D];第四軍醫(yī)大學;2014年

  本文關(guān)鍵詞：利用ADAMTS-18基因敲除小鼠研究ADAMTS-18在骨骼發(fā)育中的作用及機制，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：301198