為研究腸炎沙門菌外膜蛋白YbjX對(duì)該菌致病作用的影響,本研究利用λ-Red同源重組系統(tǒng)構(gòu)建了腸炎沙門菌（C50336）YbjX基因缺失突變株（C50336ΔYbjX）,并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行分析,探究YbjX蛋白在腸炎沙門菌致病過(guò)程中的作用。結(jié)果顯示,缺失株C50336ΔYbjX與野生型菌株和回復(fù)菌株相比,其生長(zhǎng)速度、生化特性無(wú)明顯差異,但其在血清中和蛋清中的存活能力明顯下降。此外,藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明YbjX基因缺失會(huì)引起沙門菌藥物敏感性增強(qiáng)。進(jìn)一步的,動(dòng)物致病性實(shí)驗(yàn)表明,YbjX基因缺失會(huì)引起沙門菌毒力和巨噬細(xì)胞內(nèi)存活能力的嚴(yán)重下降。本研究證實(shí)YbjX基因與腸炎沙門菌毒力密切相關(guān),為進(jìn)一步闡釋腸炎沙門菌感染致病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào). 2019,35(04)北大核心

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【部分圖文】：

圖１腸炎沙門菌ＹｂＸ基因缺失株的驗(yàn)證Ｍ．ＤＬ２０００ｐｌｕｓＭａｒｋｅｒ；１．Ｃ５０３３６；２．Ｃ５０３３６ＹｂｊＸ：：ｃａｔ；３．Ｃ５０３３６ΔＹｂｊＸ

因缺失菌株和回補(bǔ)菌株等量感染鼠源巨噬細(xì)胞Ｒａｗ２６４．７，測(cè)定３者在鼠源巨噬細(xì)胞內(nèi)存活能力。結(jié)果顯示，野生型細(xì)菌在Ｒａｗ２６４．７細(xì)胞內(nèi)的增殖率（２３ｈ／３ｈ）達(dá)到４０多倍，而對(duì)應(yīng)的ＹｂｊＸ基因缺株在Ｒａｗ２６４．７細(xì)胞內(nèi)的增殖率（２３ｈ／３ｈ）率約２６倍（圖３），下降顯著（Ｐ＜０．０５）。上述結(jié)果表明，ＹｂｊＸ蛋白參與調(diào)控腸炎沙門菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)的存活和增殖。２．６ＹｂｊＸ基因缺失對(duì)腸炎沙門菌血清和蛋清生存圖３ＹｂｊＸ基因缺失對(duì)腸炎沙門菌Ｃ５０３３６在巨噬細(xì)胞Ｒａｗ２６４．７胞內(nèi)存活的影響Ｆｉｇ．３ＳｕｒｖｉｖａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣ５０３３６ｉｓｏｇｅｎｉｃｄｅｌｅｔｉｏｎｓｔｒａｉｎｓｂｙＲａｗ２６４．７ｃｅｌｌｓ的影響將腸炎沙門菌野生型菌株、ＹｂｊＸ基因缺失株及回補(bǔ)菌株與健康雞血清混合，評(píng)測(cè)其在血清中生存的影響，結(jié)果（圖４Ａ）顯示，野生型菌株能夠在雞血清中很好的增殖，而ＹｂｊＸ基因缺失株生長(zhǎng)速率遠(yuǎn)低于野生型菌株，回復(fù)菌株血清生存能力得到部分恢復(fù)。進(jìn)一步，我們檢測(cè)了腸炎沙門菌各菌株在蛋清中存活能力。結(jié)果表明（圖４Ｂ）ＹｂｊＸ基因缺失后腸炎沙門菌在蛋清內(nèi)的存活能力顯著下降，證明ＹｂｊＸ蛋白參與腸炎沙門菌的蛋內(nèi)存活。２．７ＹｂｊＸ基因缺失對(duì)腸炎沙門菌毒力的影響利用小鼠模型測(cè)定腸炎沙門菌野生型菌株和ＹｂｊＸ基因缺失株的ＬＤ５０，Ｃ５０３３６和缺失菌株的ＬＤ５０分別為３．９８×１０５和１．４３×１０７ｃｆｕ，表明缺失株毒

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]沙門菌效應(yīng)蛋白對(duì)宿主細(xì)胞的影響及分子機(jī)制[J]. 王佐強(qiáng),姚玉峰.  微生物學(xué)報(bào). 2018(07)
[2]致泥鰍點(diǎn)狀出血征溫和氣單胞菌的分類鑒定[J]. 張志強(qiáng),李永慧,吳同壘,楊楠,王紅彬,單曉楓,康元環(huán),潘曉藝,史秋梅,高桂生.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(06)
[3]沙門氏菌生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 朱奇,陸斌興,覃有泉,樊秋云.  疾病監(jiān)測(cè)與控制. 2015(07)
[4]非編碼小RNA（sraB）調(diào)控腸炎型沙門菌的抗蛋清抑菌作用[J]. 蔣惠源,曹鳴輝,曹學(xué)松,顧宏偉,曾科.  微生物學(xué)報(bào). 2010(11)



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