本文關(guān)鍵詞：動、靜脈移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性期腦梗死模型的比較，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探討大鼠缺血再灌注(ischemia-reperfusion)6小時分別經(jīng)動、靜脈途徑移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMSCs)后,對血清腫瘤壞死因子(TNF-α)水平;缺血半暗帶處星形膠質(zhì)細(xì)胞(GFAP)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、B淋巴細(xì)胞瘤-2基因蛋白(Bcl-2)、bcl-2相關(guān)x蛋白(Bax)、凋亡細(xì)胞數(shù)、神經(jīng)功能缺損評分(mNSS)和體重計數(shù)的影響以及干細(xì)胞在器官分布有無差異,初步探討B(tài)MSCs治療急性腦梗死的具體機(jī)制和比較動、靜脈移植途徑差異。方法:1、采用改良線栓法栓塞阻隔大鼠大腦中動脈供血供氧,制作MCAO模型。2、采用全骨髓貼壁分離法提取、提純和擴(kuò)增培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,流式細(xì)胞儀檢測鑒定細(xì)胞表面抗原,氯甲基苯甲酰胺(CM-dil)染色標(biāo)記BMSCs以示蹤。3、MCAO6小時后分別經(jīng)頸動脈、尾靜脈途徑移植等劑量的BMSCs和被標(biāo)記的BMSCs。4、移植后第7天觀察記錄神經(jīng)功能缺損評分和體重計數(shù)。5、酶聯(lián)免疫吸附劑測定血清TNF-α水平。6、免疫組化測定GFAP、VEGF、Bcl-2和Bax表達(dá)。7、原位末端標(biāo)記法測定缺血半暗帶處凋亡細(xì)胞數(shù)。8、熒光觀察BMSCs在腦組織、肺臟、脾臟、肝臟、腎臟和心臟的分布差異。結(jié)果:1、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原結(jié)果示:CD90表達(dá)率為95.7%、CD29表達(dá)率為97.3%、CD106表達(dá)率為52.7%、CD11b表達(dá)率為6.01%、CD34表達(dá)率為2.95%、CD45表達(dá)率為2.26%。2、頸動脈BMSCs組mNSS評分顯著小于頸動脈PBS組,尾靜脈BMSCs組mNSS評分顯著小于尾靜脈PBS組,頸動脈BMSCs和尾靜脈BMSCs組相比較mnss評分無差異;頸動脈bmscs體重計數(shù)顯著大于頸動脈pbs組,尾靜脈bmscs組體重計數(shù)顯著大于尾靜脈pbs組,頸動脈bmscs和尾靜脈pbs組體重計數(shù)比較無差異。3、gfap陽性細(xì)胞主要集中在梗死中心周邊缺血半暗帶處,移植組陽性細(xì)胞數(shù)顯著大于pbs組,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組相比較無差異。vegf陽性細(xì)胞數(shù)在缺血半暗帶處強(qiáng)表達(dá),尾靜脈bmscs組陽性表達(dá)強(qiáng)于尾靜脈pbs組,頸動脈bmscs和頸動脈pbs組陽性表達(dá)無差異,但頸動脈bmscs組有增高趨勢,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組陽性表達(dá)無差異。4、vegf在尾靜脈bmscs組顯著大于尾靜脈pbs組,頸動脈bmscs組和頸動脈pbs組無統(tǒng)計學(xué)差異,但頸動脈bmscs組有增高趨勢,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組無統(tǒng)計學(xué)差異。5、bcl-2陽性細(xì)胞普遍見于梗死側(cè)和健側(cè)大腦半球,腦梗死缺血半暗帶處陽性表達(dá)最為強(qiáng)烈。暫且不論移植途徑差異,bmscs組陽性細(xì)胞累積光密度值顯著多于pbs組。頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組陽性細(xì)胞累積光密度值無差異。bax陽性細(xì)胞主要集中表達(dá)于缺血半暗帶處,頸動脈bmscs組、尾靜脈bmscs組、頸動脈pbs組和尾靜脈pbs組陽性細(xì)胞累積光密度值比較無差異。6、頸動脈bmscs組血清tnf-α濃度值顯著低于頸動脈pbs組,尾靜脈bmscs組顯著低于尾靜脈pbs組,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組血清tnf-濃度值無統(tǒng)計學(xué)差異,頸動脈pbs組較尾靜脈pbs組血清tnf-α濃度值有增高趨勢,但無統(tǒng)計學(xué)差異。7、凋亡細(xì)胞主要出現(xiàn)在缺血半暗帶處,健側(cè)未見陽性細(xì)胞。bmscs組凋亡細(xì)胞數(shù)顯著小于pbs組,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組陽性細(xì)胞數(shù)無差異。8、示蹤標(biāo)記的bmscs主要集中于肺臟和脾臟,梗死周圍組織可見干細(xì)胞分布,健側(cè)未見;肝臟和腎臟干細(xì)胞分布較少,心臟未見干細(xì)胞熒光信號,頸動脈bmscs組和尾靜脈bmscs組中同一器官干細(xì)胞分布數(shù)量無統(tǒng)計學(xué)差異。結(jié)論:bmscs可通過增強(qiáng)gfap、vegf的表達(dá),維持神經(jīng)血管單元的完整性,增加bcl-2的表達(dá)、減少凋亡細(xì)胞數(shù),降低炎癥因子tnf-α水平,以促進(jìn)缺血再灌注后神經(jīng)功能的恢復(fù)。在缺血再灌注6小時經(jīng)頸動脈和尾靜脈途徑移植bmscs后干細(xì)胞在各器官分布和療效無差異。但尾靜脈途徑創(chuàng)傷微小,可接受細(xì)胞量多,為腦梗死早期最佳移植途徑。
【關(guān)鍵詞】：缺血再灌注 腦梗死 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 移植 凋亡 動物模型
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R743.3;R-332
【目錄】：

• 摘要3-6
• ABSTRACT6-11
• 中英縮略詞表11-12
• 第1章 前言12-14
• 第2章 材料與方法14-24
• 2.1 實驗動物及分組14
• 2.2 試劑14-15
• 2.3 儀器15-16
• 2.4 手術(shù)材料和器械16
• 2.5 BMSCs分離、培養(yǎng)、擴(kuò)增、鑒定和染色16-17
• 2.6 MACO模型制作17-18
• 2.7 神經(jīng)功能缺損評分18-19
• 2.8 移植19
• 2.9 體重測量及材料獲取19-20
• 2.10 免疫組化20
• 2.11 TUN EL檢測20-21
• 2.12 ELISA檢測21-22
• 2.13 圖片采集和分析22-23
• 2.14 數(shù)據(jù)處理統(tǒng)計分析23-24
• 第3章 結(jié)果24-35
• 3.1 BMSCs鑒定和熒光標(biāo)記24-25
• 3.2 MCAO模型體重及mNSS變化25-26
• 3.3 免疫組化結(jié)果26-32
• 3.4 血清ELISA檢測結(jié)果32
• 3.5 BMSCs全身主要器官分布及其數(shù)量差異32-35
• 第4章 討論35-38
• 第5章 結(jié)論與展望38-39
• 5.1 結(jié)論38
• 5.2 展望38-39
• 致謝39-40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 附錄43-44
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果44-45
• 綜述45-53
• 參考文獻(xiàn)50-53

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 章軍建,阮旭中,張?zhí)K明;大鼠局灶性腦缺血模型缺血半暗帶的定位研究[J];中國臨床神經(jīng)科學(xué);2000年03期

2 張運周,尹嶺,朱克;正電子發(fā)射計算機(jī)斷層顯像判定缺血半暗帶[J];中華老年心腦血管病雜志;2000年05期

3 張明;缺血半暗帶演變及早期干預(yù)的進(jìn)展[J];臨床薈萃;2001年16期

4 張運周,尹嶺,朱克;缺血半暗帶的神經(jīng)影像學(xué)判定[J];國外醫(yī)學(xué)腦血管疾病分冊;2001年05期

5 蘆鵬飛;吳江;;缺血半暗帶的影像學(xué)判定[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2006年06期

6 ;缺血半暗帶[J];中國卒中雜志;2006年01期

7 尹春麗;;缺血半暗帶的影像學(xué)判定[J];職業(yè)與健康;2009年17期

8 肖小華,黃如訓(xùn);缺血半暗帶的研究進(jìn)展[J];國外醫(yī)學(xué)(腦血管疾病分冊);1999年05期

9 ;守好“缺血半暗帶”等于抓住半個生命[J];藥物與人;2013年09期

10 廖曉凌;王伊龍;王擁軍;薛靜;高培毅;劉梅麗;于蘭;;臨床核磁彌散成像不匹配對預(yù)測缺血半暗帶的價值[J];中華老年心腦血管病雜志;2007年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 徐運;李敬偉;李杰;;人尿激肽酶原改善缺血半暗帶的臨床研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

2 饒明俐;吳江;;腦出血灶周組織損傷機(jī)制及灶周損傷區(qū)是缺血半暗帶嗎?[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

3 黎祥噴;邢詒剛;;NURR1基因轉(zhuǎn)染C17.2神經(jīng)干細(xì)胞移植治療實驗性局灶性腦缺血(摘要)[A];第九次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)大會論文匯編[C];2006年

4 許賢平;楊曉蘇;楊期東;閻紅靜;;LM04/pCREB/pStat3在局灶性腦缺血再灌注大鼠中的表達(dá)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三次全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2010年

5 孫美艷;趙曉勇;呂海港;任鵬程;高昌俊;柴偉;孫緒德;;異氟醚預(yù)處理對局灶性腦缺血再灌注損傷大鼠缺血半暗帶TLR4-MyD88信號通路的影響[A];全國第三次麻醉藥理學(xué)術(shù)會議論文集[C];2012年

6 黃杰;馬玉娟;方征宇;種玉飛;隨燕芳;尤春景;;高頻rTMS對腦梗死大鼠缺血半暗帶超微結(jié)構(gòu)和BDNF表達(dá)的影響[A];中國康復(fù)醫(yī)學(xué)會第八屆全國康復(fù)治療學(xué)術(shù)年會資料及論文匯編[C];2011年

7 趙亞鋒;郭淮蓮;程敏;;腦缺血再灌注大鼠腹腔注射ANG后缺血半暗帶凋亡細(xì)胞數(shù)目的變化[A];第十一屆全國神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2008年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 江山 張彬;挽救腦“缺血半暗帶”[N];經(jīng)濟(jì)參考報;2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 徐光軍;腦靜脈竇血栓形成的臨床研究[D];山東大學(xué);2016年

2 張慧博;兔腦血流動力學(xué)與缺血半暗帶多層螺旋CT灌注成像的實驗研究[D];中國醫(yī)科大學(xué);2005年

3 陳英敏;BOLD及MRS腦溫測量對缺血半暗帶的價值：實驗研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2008年

4 鐘高賢;腦缺血半暗帶界定及無創(chuàng)腦水腫監(jiān)護(hù)的臨床研究[D];華中科技大學(xué);2006年

5 許賢平;LMO4/pCREB/pStat3在局灶性腦缺血再灌注大鼠中的表達(dá)及依達(dá)拉奉的干預(yù)研究[D];中南大學(xué);2010年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王萬松;動、靜脈移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性期腦梗死模型的比較[D];南昌大學(xué)醫(yī)學(xué)院;2015年

2 溫家華;全腦CT灌注成像快速評價腦梗死核心及缺血半暗帶研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

3 張勇;探討磁共振ASL技術(shù)對缺血半暗帶的診斷價值—與CTP比較[D];青海大學(xué);2016年

4 姜傳武;兔腦缺血半暗帶磁共振擴(kuò)散和灌注加權(quán)成像的實驗研究[D];青島大學(xué);2007年

5 邊唯韋;灌注CT原始圖像鑒別梗死中心與缺血半暗帶[D];大連醫(yī)科大學(xué);2011年

6 張莉;腦梗死缺血半暗帶的MR彌散加權(quán)成像研究[D];延邊大學(xué);2012年

7 駱嵩;SWI對腦梗死急性期缺血半暗帶界定與PWI的對照研究[D];吉林大學(xué);2013年

8 趙靜玉;DWI、ADC、MRA在急性腦梗死中的診斷及缺血半暗帶判斷價值[D];延邊大學(xué);2009年

9 蔣一楊;腦梗死急性期缺血組織可恢復(fù)率與遠(yuǎn)期預(yù)后的關(guān)系[D];吉林大學(xué);2014年

10 邢飛;動脈自旋標(biāo)記與動態(tài)磁敏感對比增強(qiáng)MRI在腦卒中缺血半暗帶的對照研究[D];蘇州大學(xué);2014年

  本文關(guān)鍵詞：動、靜脈移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療急性期腦梗死模型的比較，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：299864