目的探討骨形成蛋白7對大鼠不同部位脂肪組織脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞（AD-MSCs）誘導(dǎo)分化成棕色樣脂肪細(xì)胞的影響。方法分離大鼠背部肩胛間區(qū)棕色脂肪組織（i BAT）、雙側(cè)下肢腹股溝皮下白色脂肪組織（s WAT）和附睪白色脂肪組織（e WAT）,分別提取脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng),用骨形成蛋白7誘導(dǎo)干細(xì)胞分化。細(xì)胞免疫熒光染色、油紅O染色鑒定棕色樣脂肪細(xì)胞,PCR法檢測棕色脂肪相關(guān)基因表達(dá)。結(jié)果 i BAT和s WAT組誘導(dǎo)細(xì)胞中出現(xiàn)成簇聚集的空泡狀細(xì)胞,空泡狀細(xì)胞油紅O染色為紅色,解偶聯(lián)蛋白1免疫熒光染色陽性。e WAT組僅有散在的空泡狀細(xì)胞,解偶聯(lián)蛋白1免疫熒光染色陰性。反轉(zhuǎn)錄PCR顯示i BAT和s WAT組細(xì)胞高表達(dá)解偶聯(lián)蛋白1基因,未檢測到e WAT組細(xì)胞表達(dá)解偶聯(lián)蛋白1基因。結(jié)論大鼠體內(nèi)不同部位脂肪組織源干細(xì)胞的基因表達(dá)及分化潛能不同。 

【文章來源】：中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報. 2014,36(06)北大核心

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培養(yǎng)第7天光學(xué)顯微鏡下大鼠AD-MSCs的形態(tài)(×40)

成蛋白7對大鼠不同部位脂肪源干細(xì)胞分化成棕色樣脂肪細(xì)胞的影響Vol.36No.6657因表達(dá)水平高于iBAT細(xì)胞;sWAT組細(xì)胞經(jīng)BMP7誘導(dǎo)后PＲDM16基因表達(dá)幅度明顯高于iBAT組細(xì)胞，而eWAT組細(xì)胞經(jīng)BMP7誘導(dǎo)后PＲDM16基因表達(dá)卻低于對照組(P均＜0.05)(圖6)。AD-MSCs:脂肪源間充質(zhì)干細(xì)胞AD-MSCs:adipose-derivedmesenchymalstemcells圖1培養(yǎng)第7天光學(xué)顯微鏡下大鼠AD-MSCs的形態(tài)(×40)Fig1MorphologyofratAD-MSCsontheseventhdaybyusingopti-calmicroscope(×40)PE:藻紅蛋白;APC:別藻藍(lán)蛋白PE:phycoerthrin;APC:allophycocyanin圖2大鼠AD-MSCs表面分子CD29、CD45的流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果Fig2ＲesultsoftheflowcytometryonratAD-MSCscellsurfacemoleculesCD29andCD45iBAT:肩胛間區(qū)棕色脂肪組織;BMP7:骨形成蛋白7iBAT:interscapularbrownadiposetissue;BMP7:bonemorphoge-neticprotein7A.光學(xué)顯微鏡下分化脂肪樣細(xì)胞的形態(tài)(×100);B.UCP1的免疫熒光染色結(jié)果(×100)A.morphologiesofAD-MSCsdifferentiationonopticalmicroscope(×100);B.immunofluorescencestainingofUCP1(×100)圖3iBAT來源AD-MSCs經(jīng)BMP7誘導(dǎo)6d后的細(xì)胞形態(tài)Fig3MorphologiesofAD-MSCsisolatedfromiBATafterBMP7in-ductionfor6days圖4脂肪樣細(xì)胞油紅“O”染色結(jié)果(×100)Fig4Adipocytesstainedbyoilred“O”(×100)sWAT:腹股溝皮下白色脂肪組織;eWAT:附睪白色脂肪組織;M:marker;Con:對照組sWAT:inguinalsubcutaneouswhiteadiposetissue;eWAT:epidid-ymalwhiteadiposetissue;M:marker;Con:controlgroup圖5BMP7誘導(dǎo)6d后，iBAT、sWAT和eWAT組細(xì)胞表達(dá)UCP1基因的ＲT-PCＲ檢測結(jié)果Fig5ＲT-PCＲresultofUCP1geneexpressionofAD-MSCsisolatedfromiBAT，sWAT，andeWATafterBMP7induc

果Fig2ＲesultsoftheflowcytometryonratAD-MSCscellsurfacemoleculesCD29andCD45iBAT:肩胛間區(qū)棕色脂肪組織;BMP7:骨形成蛋白7iBAT:interscapularbrownadiposetissue;BMP7:bonemorphoge-neticprotein7A.光學(xué)顯微鏡下分化脂肪樣細(xì)胞的形態(tài)(×100);B.UCP1的免疫熒光染色結(jié)果(×100)A.morphologiesofAD-MSCsdifferentiationonopticalmicroscope(×100);B.immunofluorescencestainingofUCP1(×100)圖3iBAT來源AD-MSCs經(jīng)BMP7誘導(dǎo)6d后的細(xì)胞形態(tài)Fig3MorphologiesofAD-MSCsisolatedfromiBATafterBMP7in-ductionfor6days圖4脂肪樣細(xì)胞油紅“O”染色結(jié)果(×100)Fig4Adipocytesstainedbyoilred“O”(×100)sWAT:腹股溝皮下白色脂肪組織;eWAT:附睪白色脂肪組織;M:marker;Con:對照組sWAT:inguinalsubcutaneouswhiteadiposetissue;eWAT:epidid-ymalwhiteadiposetissue;M:marker;Con:controlgroup圖5BMP7誘導(dǎo)6d后，iBAT、sWAT和eWAT組細(xì)胞表達(dá)UCP1基因的ＲT-PCＲ檢測結(jié)果Fig5ＲT-PCＲresultofUCP1geneexpressionofAD-MSCsisolatedfromiBAT，sWAT，andeWATafterBMP7inductionfor6days

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Distinction of white,beige and brown adipocytes derived from mesenchymal stem cells[J]. Anna Park,Won Kon Kim,Kwang-Hee Bae.  World Journal of Stem Cells. 2014(01)



本文編號：2993502