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可溶性DC-SIGN和病毒性趨化因子vMIP2的重組表達(dá)和抗HIV-1的研究

發(fā)布時間:2021-01-19 14:11
  本論文共分為三章。第一章是前言綜述,介紹了近年來在艾滋病研究領(lǐng)域中HIV(Human immunodeficiency virus)侵入細(xì)胞這一過程的研究進(jìn)展。分為3個部分:艾滋病的流行現(xiàn)狀、HIV輔助受體研究進(jìn)展和DC-SIGN(dendritic-cell-specific ICAM-grabbing nonintegrin)與HIV感染。第二章是DC-SIGN融合蛋白的表達(dá)、純化和活性分析。從樹突狀細(xì)胞(Dendritic Cells,DC)的mRNA擴(kuò)增出DC-SIGN基因,克隆到載體pcDNA3.1。重新設(shè)計引物,用PCR法擴(kuò)增出DC-SIGN凝集素片段的cDNA,克隆到表達(dá)載體pET32-a(+)。酶切、序列分析表明該外源基因已成功克隆到載體上,并且讀碼框正確。用CaCl2法將重組載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌AD494(DE3),誘導(dǎo)后SDS-PAGE分析顯示DC-SIGN融合蛋白在該原核表達(dá)系統(tǒng)中高效表達(dá)。利用融合蛋白上的(His)6序列,用親和層析的方法純化出該融合蛋白,并用Western blot實驗進(jìn)行驗證。DC-SIGN融合蛋白與HIV的親和實驗表明該蛋白可以競爭性的抑制HI... 

【文章來源】:中國科學(xué)院大學(xué)(中國科學(xué)院武漢病毒研究所)湖北省

【文章頁數(shù)】:59 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
"><中文摘要>
"><中文關(guān)鍵詞>
"><英文摘要>
"><英文關(guān)鍵詞>
中文摘要
英文摘要
英文縮寫表
第一章 前言綜述
    1 艾滋病的流行現(xiàn)狀
    2 HIV輔助受體研究進(jìn)展
    3 DC-SIGN和HIV感染
    本研究論文的目標(biāo)和內(nèi)容
第二章 可溶性DC-SIGN的表達(dá)、純化及其生物學(xué)活性分析
">    <中文摘要>
">    <中文關(guān)鍵詞>
    材料和方法
        1 材料
        2 實驗方法
    結(jié) 果
        1 重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-dlectin的構(gòu)建
        2 重組質(zhì)粒pET-32a(+)-dlectin的酶切鑒定
        3 重組質(zhì)粒pET-32a(+)-dlectin的誘導(dǎo)表達(dá)
        4 DC-SIGN 融合蛋白的親和純化
        5 DC-SIGN 融合蛋白的Western blot鑒定
        6 DC-SIGN 融合蛋白生物活性分析
    討論
第三章 病毒性趨化因子vMIP2的表達(dá)、純化及抗HIV-1的研究
">    <中文摘要>
">    <中文關(guān)鍵詞>
    材料和方法
        1 材料
        2 實驗方法
    結(jié)果
        1 重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-vmip2的構(gòu)建
        2 重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-vmip2的酶切和PCR驗證
        3 重組表達(dá)質(zhì)粒pET-32a(+)-vmip2誘導(dǎo)表達(dá)
        4 vMIP2的純化
        5 vMIP2的Western blot鑒定
        6 vMIP2抗HIV-1的活性分析
討論
"><參考文獻(xiàn)>
參考文獻(xiàn)
發(fā)表和待發(fā)表的文章
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]以CCR5為作用靶點的抗艾滋病藥物的研究進(jìn)展[J]. 馬新鋒,張先恩,胡勤學(xué).  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2002(06)
[2]趨化因子超家族研究進(jìn)展[J]. 劉祝公,陳慰峰.  生命科學(xué). 1996(03)



本文編號:2987140

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