骨髓間充質干細胞誘導分化成骨細胞支持臍血造血干/祖細胞培養(yǎng)研究
發(fā)布時間:2021-01-17 19:39
背景與目的 現(xiàn)代實驗血液學中,體外模擬造血干祖細胞(HSPCs)在體內(nèi)的生存、增殖、分化、自我更新等生理活動所需的造血微環(huán)境,探索研究造血干祖細胞體外培養(yǎng)和擴增的最適條件一直是倍受關注的課題。近年來的相關研究越來越清楚地認識到:成骨細胞是由間充質干細胞定向分化而來,是骨髓內(nèi)造血微環(huán)境重要的細胞成分之一,是構建HSC生態(tài)位區(qū)至關重要的支撐成分,并對位居其中的造血干祖細胞細胞(HSPCs)生存、遷移、增殖、自我更新以及保持其多向分化潛能等起著關鍵性調控作用。造血干細胞生態(tài)位區(qū)(hematopoietic stem cells niche)是從物理空間結構和功能的角度對造血微環(huán)境進行的闡釋,它主要是由成骨細胞,骨髓間充質細胞,以及類骨質(osteoid)構成的能容納一個或更多的造血干細胞的空間結構單位,位居其間的造血干細胞通過與相鄰微環(huán)境(包括成骨細胞)相互作用來調控HSC的生存,增殖,分化以及自我更新。 本研究正是基于目前對成骨細胞與造血生態(tài)位區(qū)關系的最新認識,為了探索造血干祖細胞(HSPCs)體外培養(yǎng)的最適條件,也有別于現(xiàn)有的造血干細胞培養(yǎng)體系,提出了將骨髓間充質干細胞誘導分...
【文章來源】:四川大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:108 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
人骨髓間充質干細胞誘導分化的成骨樣細胞鑒定:A、誘導分化
AB圖3A、人MSCs誘導分化的成骨樣細胞為飼養(yǎng)細胞層建立二維培養(yǎng)體系,HspCs接種于其上培養(yǎng)lw;B、人Mscs誘導分化的成骨樣細胞為飼養(yǎng)細胞層建立二維培養(yǎng)體系,HSpcs接種于其上培養(yǎng)w3(X200,箭頭所指為HSPCs)4培養(yǎng)w1后造血祖細胞集落與LTC一CI分析無外源性細胞因子作用下,臍血造血干細胞在二維培養(yǎng)體系中培養(yǎng)7天后,進行造血祖細胞集落實驗。比較各組間的CUF一C和HPP一CCF沒有顯著差異(P>0.05);而D組TLC一工C與其他各組間比較差異顯著(P<0.05)(見表1,圖表1,圖4)表1培養(yǎng)lw后各組l’de造血干/祖細胞CFu一C,H即一C「C和L下C一IC比較(萬士s)
AB圖6培養(yǎng)w3后D組造血干/祖細胞TLC一Cl集落細胞涂片wright一Gimesa染色,觀察到有向紅系和粒系等的多向分化A(x400;Bx1000)討論近年來的研究越來越明確:由骨髓間充質干細胞定向分化而來的成骨細胞是造血生態(tài)位區(qū)(hematopoieticniche,HSC)的主要構成成分,對HSC的生存,增殖、分化、自我更新以及保持多向分化潛能起著關鍵
【參考文獻】:
期刊論文
[1]增強型綠色熒光蛋白基因電穿孔轉染骨髓間充質干細胞的研究[J]. 王曉軍,崔連群,王敏,劉繼東,李峰,蓋玉生. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2005(01)
[2]綠色熒光蛋白體外轉染與體內(nèi)示蹤成骨細胞的研究[J]. 任高宏,劉曉靜,楊磊,裴國獻. 中華整形外科雜志. 2004(06)
[3]生物衍生骨支架材料的組織相容性研究[J]. 楊志明,李彥林,解慧琪,秦廷武,黃富國. 中華整形外科雜志. 2002(01)
[4]生物衍生骨支架材料的體外細胞相容性實驗研究[J]. 李彥林,楊志明,解慧琪,秦廷武,黃富國. 中國修復重建外科雜志. 2001(04)
[5]綠色熒光蛋白——現(xiàn)代細胞生物學與分子生物學研究領域的新標記物[J]. 岳莉莉,齊義鵬. 生物工程進展. 1997(04)
本文編號:2983474
【文章來源】:四川大學四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:108 頁
【學位級別】:博士
【部分圖文】:
人骨髓間充質干細胞誘導分化的成骨樣細胞鑒定:A、誘導分化
AB圖3A、人MSCs誘導分化的成骨樣細胞為飼養(yǎng)細胞層建立二維培養(yǎng)體系,HspCs接種于其上培養(yǎng)lw;B、人Mscs誘導分化的成骨樣細胞為飼養(yǎng)細胞層建立二維培養(yǎng)體系,HSpcs接種于其上培養(yǎng)w3(X200,箭頭所指為HSPCs)4培養(yǎng)w1后造血祖細胞集落與LTC一CI分析無外源性細胞因子作用下,臍血造血干細胞在二維培養(yǎng)體系中培養(yǎng)7天后,進行造血祖細胞集落實驗。比較各組間的CUF一C和HPP一CCF沒有顯著差異(P>0.05);而D組TLC一工C與其他各組間比較差異顯著(P<0.05)(見表1,圖表1,圖4)表1培養(yǎng)lw后各組l’de造血干/祖細胞CFu一C,H即一C「C和L下C一IC比較(萬士s)
AB圖6培養(yǎng)w3后D組造血干/祖細胞TLC一Cl集落細胞涂片wright一Gimesa染色,觀察到有向紅系和粒系等的多向分化A(x400;Bx1000)討論近年來的研究越來越明確:由骨髓間充質干細胞定向分化而來的成骨細胞是造血生態(tài)位區(qū)(hematopoieticniche,HSC)的主要構成成分,對HSC的生存,增殖、分化、自我更新以及保持多向分化潛能起著關鍵
【參考文獻】:
期刊論文
[1]增強型綠色熒光蛋白基因電穿孔轉染骨髓間充質干細胞的研究[J]. 王曉軍,崔連群,王敏,劉繼東,李峰,蓋玉生. 中國組織化學與細胞化學雜志. 2005(01)
[2]綠色熒光蛋白體外轉染與體內(nèi)示蹤成骨細胞的研究[J]. 任高宏,劉曉靜,楊磊,裴國獻. 中華整形外科雜志. 2004(06)
[3]生物衍生骨支架材料的組織相容性研究[J]. 楊志明,李彥林,解慧琪,秦廷武,黃富國. 中華整形外科雜志. 2002(01)
[4]生物衍生骨支架材料的體外細胞相容性實驗研究[J]. 李彥林,楊志明,解慧琪,秦廷武,黃富國. 中國修復重建外科雜志. 2001(04)
[5]綠色熒光蛋白——現(xiàn)代細胞生物學與分子生物學研究領域的新標記物[J]. 岳莉莉,齊義鵬. 生物工程進展. 1997(04)
本文編號:2983474
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