目的:用人促甲狀腺激素受體（hTSHR）的全長(zhǎng)cDNA基因免疫BALB/c小鼠后,再以其活化的脾細(xì)胞免疫同源BALB/c小鼠而獲得類似人類Graves病的動(dòng)物模型,從而為進(jìn)一步的研究奠定基礎(chǔ)。 方法:第一階段,將6-8周齡的雌性BALB/c小鼠隨機(jī)分為兩組（a組和b組）,以布比卡因和對(duì)羥基苯甲酸甲酯預(yù)處理后,分別用重組質(zhì)粒pcDNA3.1/hTSHR和空質(zhì)粒pcDNA3.1（+） 100μg脛前肌注射,第3和6周加強(qiáng)免疫兩次。18周時(shí)分別處死兩組小鼠,機(jī)械分離其脾細(xì)胞。第二階段,分別用前述a組（注射重組質(zhì)粒組）和b組（注射空質(zhì)粒組）小鼠的脾細(xì)胞免疫同源的兩組6-8周齡雌性BALB/c小鼠（實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組）。4周后處死動(dòng)物,分離其甲狀腺行普通光學(xué)顯微鏡和透射電鏡檢查;摘眼球取血,以放射免疫法測(cè)定小鼠血清TT₄水平、免疫放射法測(cè)定血清TSH水平和ELISA法檢測(cè)血清TRAb。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組16只小鼠中的7只小鼠（44%）出現(xiàn)甲狀腺腫大、充血。光鏡下見(jiàn)明顯的小濾泡增生,濾泡上皮細(xì)胞增多、變大呈高立方形,偶見(jiàn)小乳頭形成突向?yàn)V泡腔內(nèi);腔內(nèi)膠質(zhì)含量少,部分可見(jiàn)吸收空泡;濾泡間... 

【文章來(lái)源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒和空質(zhì)粒電泳結(jié)果

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生畢業(yè)論文ification of the recombinant and blank plasmid by lectrophorearker（λDNA/Hind III）；: PcDNA3.1/hTSHR；NA3.1(+).A3.1/hTSHR 重組質(zhì)粒的酶切鑒定 （ + ）含有 Hind III 、 BamH I 及 Xba I 等多HR 重組質(zhì)粒分別經(jīng) BamH I 和 EcoR I 單酶切，切帶；當(dāng)質(zhì)粒經(jīng) EcoR I 和 Xba I 雙酶切時(shí)則可切出一條R cDNA 片段的大�。�(見(jiàn)圖 2)。1

/hTSHR 重組質(zhì)粒和 PcDNA3.1(+)大量提取的電泳 the recombinant plasmid and blank plasmid by elect(λDNA/Hind III)；+）；1/hTSHR.紫外分光光度計(jì)鑒定純度和含量（表 1）。其內(nèi)毒素和蛋白質(zhì)污染，可進(jìn)一步用于免疫動(dòng)表 1 質(zhì)粒純度和含量的測(cè)定結(jié)果A260 A280 A260/2 0.980 0.513 1.910 1.653 0.936 1.766

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]pcDNA3.1/hTSHR真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其在COS-7細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 詹升華,張徽,劉純.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2004(04)
[2]甲狀腺刺激抗體與Graves病的治療[J]. 王曉霞,靳毅明,金世鑫.  中國(guó)處方藥. 2003(03)
[3]Graves病動(dòng)物模型的研究進(jìn)展[J]. 賈悅,劉超.  國(guó)外醫(yī)學(xué).內(nèi)分泌學(xué)分冊(cè). 2001(04)



本文編號(hào)：2982031