我們分別根據(jù)人免疫球蛋白重鏈Fd段和κ鏈的 5’、3’端基因序列合成了二對引物，以抗人免疫缺陷病毒1型（HIV-1）抗體陽性患者外周血淋巴細(xì)胞中提取的mRNA為模板，通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）分別擴增出了Fd段和κ鏈基因片段，插入載體pComb3，以電擊法轉(zhuǎn)化大腸桿菌TG1，建立了庫容量為10¹3CFU／ml的人源噬菌體Fab抗體庫。同時根據(jù)HIV-1 gp120 趨化蛋白受體結(jié)合位點的氨基酸序列合成了含有Arg－419、Ile－420、Lys－421、Gln－422、Pro－438的23肽，并以此23肽為固相抗原，經(jīng)過6輪“吸附－洗脫－擴增”的篩選和ELISA法、dot blot檢測，從中獲得了7個抗HIV-1gp120 趨化蛋白受體結(jié)合位點的人源Fab抗體克隆。ELISA抑制試驗結(jié)果顯示，獲得的7株抗HIV-1gp120 趨化蛋白受體結(jié)合位點的噬菌體Fab單克隆抗體對抗HIV-1型抗體陽性者血清的抑制率在68．18％-79．38%,抑制作用明顯。67號Fab單克隆抗體的競爭性抑制試驗結(jié)果顯示能抑制抗HIV-l gp120 23肽陽性血清中抗體與 g... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：57 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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"><中文關(guān)鍵詞>
"><英文摘要>
"><英文關(guān)鍵詞>
前言
第一章 人源抗HIV-1噬菌體Fab抗體庫的建立
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
第二章 抗HIV-1 gp120 趨化蛋白受體結(jié)合位點Fab單克隆抗體的篩選
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
第三章 人源抗HIV-1 gp120 陽性噬菌體Fab單克隆抗體基因序列的分析
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
結(jié)語
"><參考文獻>
綜述
">    <參考文獻>
致謝
研究生在讀期間第一作者發(fā)表及撰寫的文章


【參考文獻】：
期刊論文
[1]人噬菌體抗體庫的構(gòu)建和甲肝抗體的篩選[J]. 杜桂鑫,于長明,毛春生,王海濤.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 2000(01)
[2]人源性抗HIV-1 V3環(huán)噬菌體抗體的基因克隆與序列分析[J]. 毛春生,李季枝,宋宏彬,于長明,杜桂鑫,王海濤.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1999(03)
[3]白細(xì)胞趨化因子及其受體[J]. 葉德全.  上海免疫學(xué)雜志. 1998(01)
[4]人抗-HBs Fab段基因的序列分析及表達[J]. 王琰,劉群英,徐建軍,王雅明,陳競?cè)A.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1995(05)
[5]人源性噬菌體抗體庫的構(gòu)建及HBsAg人單抗的篩選[J]. 陳競?cè)A,王琰,劉群英,王雅明,徐建軍,劉華.  中華微生物學(xué)和免疫學(xué)雜志. 1995(03)



本文編號：2977044