以血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子單鏈抗體（pTA-anti-VEGF-scFv）為研究對(duì)象,考察不同培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)條件對(duì)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子單鏈抗體表達(dá)量的影響。經(jīng)均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn),確定工程菌R22-4高效表達(dá)重組抗體的最佳培養(yǎng)基為以2×YT培養(yǎng)基為基礎(chǔ),添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.3%葡萄糖、1.0%酪蛋白胨、0.4%玉米漿、0.133%KH₂PO₄、0.159 6%K₂HPO₄、0.532%NaCl、0.01%微量元素、0.04%維生素B₁;誘導(dǎo)條件為30℃、0.1 mmol/L IPTG（異丙基硫代半乳糖苷,Isopropylβ-D-Thiogalactoside）誘導(dǎo)5 h。經(jīng)ELISA （酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,enzyme linked immunosorbent assay）檢測(cè),血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子單鏈抗體的表達(dá)量是原始對(duì)照組的2.27倍,實(shí)現(xiàn)了血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子單鏈抗體在大腸埃希菌中的高效表達(dá)。 

【文章來(lái)源】：微生物學(xué)雜志. 2019,39(02)

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 材料
        1.1.1 工程菌
        1.1.2 培養(yǎng)基及試劑
        1.1.3 儀器與設(shè)備
    1.2 方法
        1.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
        1.2.2 培養(yǎng)基類(lèi)型的篩選
        1.2.3 培養(yǎng)基成分單因素篩選
        1.2.4 培養(yǎng)基優(yōu)化研究
2 結(jié)果與分析
    2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
    2.2 基礎(chǔ)培養(yǎng)基的篩選
    2.3 培養(yǎng)基成分的篩選
        2.3.1 碳源的篩選
        2.3.2 氮源的篩選
        2.3.3 無(wú)機(jī)鹽、微量元素和維生素的篩選
    2.4 誘導(dǎo)條件的選擇
        2.4.1 最佳誘導(dǎo)時(shí)間的選擇
        2.4.2 誘導(dǎo)劑濃度的優(yōu)化
    2.5 均勻設(shè)計(jì)試驗(yàn)
3 討 論



本文編號(hào)：2963645