二硫鍵氧化還原異構(gòu)酶（disulfide oxidoreductase,DsbM）分布于原核細(xì)胞中,主要參與周質(zhì)空間中膜蛋白的折疊.轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子（lysR type transcriptional regulator,PA0056）是一類包含4個(gè)半胱氨酸的蛋白,當(dāng)以氧化態(tài)形式存在時(shí),可調(diào)控下游基因的轉(zhuǎn)錄,參與調(diào)節(jié)抗氧化或者抗藥性.本實(shí)驗(yàn)室前期研究證明DsbM參與氨基糖苷類耐藥性的調(diào)節(jié).關(guān)注銅綠假單胞菌中DsbM和PA0056之間的相互作用,分別構(gòu)建了酵母雙雜交（yeast two-hybrid test）和雙分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)（bi-molecular fluorescence complementation, BiFC）的載體.通過(guò)酵母雙雜交實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)DsbM和PA0056之間存在較強(qiáng)的蛋白質(zhì)相互作用.通過(guò)BiFC實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn)共同轉(zhuǎn)化表達(dá)DsbM和PA0056載體的酵母中可觀察到強(qiáng)烈的黃色熒光,表明DsbM和PA0056可以發(fā)生相互作用.本研究為深入研究DsbM在銅綠假單胞菌耐氨基糖苷類抗生素耐藥機(jī)制奠定基礎(chǔ). 

【文章來(lái)源】：南開大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2019年03期 北大核心

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利用雙分子熒光互補(bǔ)系統(tǒng)分析PA0056和DsbM蛋白間的相互作用Fig.2BiFCassayofprotein-proteininteractionsof


本文編號(hào)：2957079