目的以自體移植法建立EM大鼠模型,觀察桂枝茯苓膠囊對(duì)EM大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡、VEGF及血清雌、孕激素含量的影響,探討其治療EM的效應(yīng)機(jī)制。方法采用自體移植法建立大鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型,術(shù)后4周將造模成功大鼠隨機(jī)分為模型組、米非司酮組、散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊組、桂枝茯苓膠囊高、中、低劑量組,藥物干預(yù)4周后進(jìn)行大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡TUNEL法檢測(cè),檢測(cè)大鼠血清中雌、孕激素的含量,免疫組化法檢測(cè)Caspase-7、VEGF、survivin表達(dá)。結(jié)果桂枝茯苓高劑量組異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡率顯著高于模型組,桂枝茯苓高劑量組及米非司酮組異位內(nèi)膜Caspase-7表達(dá)均較模型組顯著升高,VEGF、survivin表達(dá)及血清雌、孕激素含量顯著降低。結(jié)論桂枝茯苓膠囊治療EMS的療效機(jī)制,可能與誘導(dǎo)異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡、下調(diào)survivin的高表達(dá)、降低VEGF表達(dá)及調(diào)節(jié)血清中雌孕激素水平密切相關(guān)。 

【文章來源】：南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào). 2019年01期 北大核心

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圖１光鏡下大鼠陰道脫落細(xì)胞涂片（×２００）造模方法在大鼠動(dòng)情期采用自體移植法動(dòng)情前期動(dòng)情前期動(dòng)情后期動(dòng)情間期

飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)１周，經(jīng)ＨＥ染色后光鏡下觀察，連續(xù)１０ｄ，并建立動(dòng)情周期檔案，選擇動(dòng)情周期規(guī)律的大鼠１３５只納入實(shí)驗(yàn)。見圖１。動(dòng)情前期動(dòng)情前期動(dòng)情后期動(dòng)情間期圖１光鏡下大鼠陰道脫落細(xì)胞涂片（×２００）１．４．２造模方法在大鼠動(dòng)情期采用自體移植法手術(shù)［２］建立動(dòng)物模型。建模成功的標(biāo)志（如圖２）為肉眼可見移植物呈囊性增大，形成囊腫，囊內(nèi)有液體積聚，表面有新生血管形成，有的移植物被結(jié)締組織覆蓋。圖２造模成功１．４．３實(shí)驗(yàn)分組及給藥經(jīng)剖腹證實(shí)造模成功的大鼠隨機(jī)分為模型組、散結(jié)鎮(zhèn)痛組、米非司酮組、桂枝茯苓膠囊低、中、高劑量組，每組１５只，灌胃過程中模型組和高劑量組各死亡１只，剩余１４只，其余每組１５只。根據(jù)施新猷《現(xiàn)代醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)》［３］中公式計(jì)算，模型組：每１００ｇ灌胃生理鹽水１ｍＬ。散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊組：每１００ｇ給予含生藥量０．０５ｇ／ｍＬ的散結(jié)鎮(zhèn)痛膠囊混懸液灌胃１ｍＬ。米非司酮組：每１００ｇ給予含生藥量０．１０４ｇ／ｍＬ的米非司酮混懸液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓膠囊低劑量組：每１００ｇ給予含生藥量０．０１４５ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓膠囊混懸液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓膠囊中劑量組：每１００ｇ給予含生藥量０．０２９ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓膠囊混懸液灌胃１ｍＬ。桂枝茯苓膠囊高劑量組：每１００ｇ給予含生藥量０．０５８ｇ／ｍＬ的桂枝茯苓膠囊混懸液灌胃１ｍＬ。所有給藥均１次／ｄ，連續(xù)４

，計(jì)算細(xì)胞的凋亡率，凋亡率＝凋亡細(xì)胞數(shù)／總細(xì)胞數(shù)×１００％；（５）雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）檢測(cè)各組大鼠血清雌、孕激素含量。１．４．６統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)采用珚ｘ±ｓ表示，兩兩比較用ｔ檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件ＳＰＳＳ２１．０進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，Ｐ＜０．０５視為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。２結(jié)果２．１光鏡下觀察大鼠異位內(nèi)膜組織病理形態(tài)學(xué)改變結(jié)果見圖３。模型組桂高組桂中組桂低組米非組散結(jié)組圖３大鼠異位內(nèi)膜組織ＨＥ染色（×１００）２．２用藥前后異位病灶體積比較結(jié)果見表１。表１用藥前后異位病灶體積比較（珚ｘ±ｓ）組別ｎ給藥前／ｍｍ３給藥后／ｍｍ３模型組１４１３９．１０±１２．８４１４４．３２±１８．０２＊桂高組１４１３８．１１±１１．７４１１１．３４±８．５６＊△桂中組１５１３９．２３±１０．５６１１５．１１±８．１３＊△桂低組１５１３８．１４±１０．７８１２１．８８±１０．７１＊△＃米非組１５１３７．５６±９．８９１１０．２２±７．５８＊△散結(jié)組１５１３７．９８±１０．６６１２１．９６±１１．８１＊△＃注：用藥前后比較，＊Ｐ＜０．０５。與模型組比較，△Ｐ＜０．０５；與桂高、米非組對(duì)比，＃Ｐ＜０．０５。２．３ＴＵＮＥＬ法檢測(cè)大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡圖片及桂枝茯苓膠囊對(duì)大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡率的影響２．３．１ＴＵＮＥＬ法檢測(cè)大鼠異位內(nèi)膜細(xì)胞凋亡結(jié)果見圖４。模型組桂高組桂中組桂低組米非組散結(jié)組圖４ＴＵＮＥＬ法

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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